transwell实验原理与步骤

应该不会有人还在一个一个数细胞数量进行 trans well 清洗结果的统计吧？ hi， 我是福尔甘小欧，本期和大家分享如何使用 image j 统计 trans well 清洗细胞数。 第一步，打开我们的 image j 软件，点击 fire open， 导入我们的 transfer 图片。第二步，选择 image j type， 将其更改为巴比特的黑白图形。 第三步，我们发现图片中有许多拍到的 trans well 的小孔，我们要尽量排除这些小孔。我们这里可以试着在 image adjust brightness or contrast 调整亮度和对比度，让背景 尽量干净，这一步也可以省略。第四步，接着选择 image adjust threshold 调整预值。 首先选择 b w， 然后移动滑块。我们调整的时候要随时看原图，尽量使得最终的所有细胞都变成黑色，不要出现细胞内部变空的情况。点击 apply 然后我们选择 allied particles， 在 size 这里设置识别颗粒的大小范围，一般设置为两百左右。 show 这里设置 outlines， 勾选 display results summarize exclude on edges 即可。 这时候每个图形上都会出现标记的数字，我们发现部分小孔图也被计算出来了，我们在结果框里可以找到其大小值。然后我们反过来重新选择 allys particles 调整技术的图像大小，确保小孔排除在外。再次点击 ok， 这时候统计获得的数值基本上就是视野内的细胞数了。 还有一点需要注意的是，我们要保证一组数据图都是在同样的设置条件下进行统计哦。最后再利用我们的作图神器 prison 噔噔噔噔将数据变成条形图。

你知道川粗奥实验流程是怎样的吗？快来跟我一起看看吧！一、胰酶消化并终止，消化后，在环境为三十七摄氏度百分之五二氧化碳的培养箱中放置四十八小时后取出。二、再用 p、 b、 s。 清洗三遍，注意 清洗过程中需轻柔操作，以免细胞漂浮。三、在孔板中加入百分之九十五的酒精，并放入小事，确保没有气泡。之后在小事内加入酒精对细胞进行固定。 四、红板中加入适量结晶子，放入小事后，在小事内加入结晶子并放置半小时，确保染色充分。五、染色后 p、 b、 s。 涮洗三遍， 除去未与细胞结合的结晶子，用棉签轻轻擦拭小事的上侧，将非特异性结合于小事上表面的染料擦掉，以便后续净简。适当风干后，在十倍显微镜下选取五个视野观察细胞并拍照。关注康吉生物，让你了解更多实验室知识！