pcr中mg+的作用
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06:06查看AI文稿AI文稿那我在做啥实验呢？我 p c 二一现在都被用了，然后想用金属浴做一个反转。就是啊，你那个 r n a 都提完了，对，质量还挺好的。浓度都测完了啊？已经测完了啊，那你做吧。你，你先把那个金属浴给预热上吧，第一步不是要那个啥吗？四十二度两分钟吗？好，我先预热上射子金属浴条件中。 行，给它升一下温，你这个现在就可以配体系了，我现在升一下样品看看。你用的是啊，诺亚家的反转式设计盒， 呃，像这个，呃，金属浴呢？我们现在用的是呃莱乔家的这个金属浴啊，其实金属浴在实验室中也是一个非常常用的一个这个实验装置啊，可以做很多的实验，你像我们生物领域 t d a 啊，体脂力啊，做酵醇化呀等等啊，包括我们的这反转路的这个 p c r 都可以用金属浴来实现啊。 然后但金属浴跟那个水浴锅相比，它其实很多的优点，对吧？它其实危险性比较低，对吧？水浴锅高温的时候会有一个蒸汽，然后呢就是极大的减小了我们的污染，因为水浴锅我们在用的过程中可能水就会对很多样品产生污染，而且这个金属浴我们还可以设置不同的这个，嗯， 循环不同的温度梯度啊，其实我们的这个 pcr 仪，它其实就是一个升温降温比较快的，比较敏感的一个金属浴啊。 行，我们看看。默默你拍完了吗？我拍完了。行，拍完了，我们稍微等一下下，他因为刚刚的室温比较低啊，稍微等一下他温度就升上去了。老师啊，怎么这个升温的时间我想有几个问题啊。行啊，我看这个世纪盒里面一般都有这个 g d a vapor， 这个 vapor 到底是什么东西呢？它有什么作用 啊？我们在这个做 r t 披萨叫 reverse transcription 披萨的时候，大部分的这个世纪盒里面都有一个 dna wrapper。 这一步啊，这个是干嘛的呢？我们这个 gdna 指的是 genetic dna， wrapper 指的是擦除的意思，它其实就是去除我们刚刚提的 rna 体系中的 dna 的 残留，知道吧？就是把这个残留给去除掉，所以你看很多的这个厂家，它可以像两步法，那第一步其实它只加入了这个 gdna 的 外壳，这个 mix， 它的目的就是在这个，一般是四十二度，在这条件下来去除你们的这个 dna， 懂吧？所以它里面含有 dna 酶啊， 懂了吗？懂了懂了，还有一个问题就是，呃，我在挑世界盒的时候有一步法跟两步法，那这有什么区别呢？呃， 不同的厂家它确实有不同的这个牌品牌啊，就不同的型号哈，就说确实有一步法，反转录也有两步法。反转录到底有什么样的区别呢？其实主要跟我们这个 g d a 的 外壳有关系，因为你看我们这个里面有这个 dna， 你 像我们现在用的这个厂家的，它用的是两步法，它一般这个 dna 呢，它都是热敏性的 dna， 所以 你看第一步，它其实加这个 g d a 外壳在四十二度调节下，对吧？四十二度调节下反应，它是来去除这个 g d a 的， 你看后面再加我们的，高温的条件下，我们的热敏感的这个 dna 就 失活了， 因为既 dna 酶，它既然可以去除我们那个 rna 中残留的 dna， 它其实也可以去除 cda， 因为 cda 也是 dna， 对 不对？所以像这种它两步法就是一个是低温来进行去除 dna， 第二步，高温来 呃进行反转录，而且使我们这个热敏的 dna 失活。但是有些厂家它用的是一步法，那就一个温度，对吧？那都怎么实现的呢？这可能就是说它用的这个 dna 里面的这个 dna 酶，它不是热敏感性的，而是特异性比较强的，它就说它可以有些酶可以特异性的去除双链的 dna， 它不不会降低，懂了吧？ 所以你就根据它的这个呃条件和它的设置，大概都能猜出来它用的是什么类型的。好，我看这个金属玉正好也升到差不多了，你可以把那个放上去了，做第一步，这个去除 dna 镜头可以拉近一下金属玉，看到陌陌操作， 而这界面设的是四十二度啊，咱们设的两分钟左右，自己看一下时间显示的还是比较不错的。那这个金属玉它其实有不同的，这个适配的这个底座啊，我们不同的实验。可以啊，那我们做 p 叉小管的用这个就行了，自己看一下，稍微看一下时间，四十二度反应两分钟，等待中。 好，时间到了，我把样品先取出来了，先设置好五十度，十五分钟条件，让它升温，再去配反转体系， 将来就先第二步了，要开始逆转路了，加入反转路世纪。准备反应 好了，温度到了，老师， 正好在这个时间。老师，我还有一个问题，嗯，怎么了？在这个说明书里面，它提到了 random prime， 还有那个 olegd t， 它们之间有什么区别？各自有什么作用啊？ 嗯，我们现在做的是这个第二步啊，这是其实这是真正的这个反转录，这一步刚刚第一步是去除我们的这个 dna， 我 们不同的厂家它也有，是吧？就是不同的这个配方啊，其实万变不离其宗，这里面主要是用的是这个反转录酶，还是，对吧？然后再加上我们的这个引物， 那么银雾呢？呃，其实市场上主要有两种，第一种就是 oligotet 的 银雾，第二种是 random prime， 当然还有比如果我们想去扩展某个特异性的基因，可以设计特异性基因的特异性银雾啊，这种比较少见。那这两有什么区别呢？你去看一下不同的厂家，它其实银雾都是一个 mix， 就是 oligotet 的 银雾跟 random prime 的 一个 mix， 而这个 d 的 引物它主要是用来就说反转录我们真核生物的这个 rna 的， 因为我们真核生物的 rna 它都有一个啡肽的尾巴，所以它这个对吧？这个 dna 它就可以特性的识别进反转录。当然我们原核的这个生物的 rna 它其实也有，但是比较少，而且也比较短，所以啊，不是很适用，那么 random prime 它其实就可以适用于扩增所有的可能性的这个， 哎，我们的这个产物什么叫 round prime 呢？它其实就是不同的核苷酸的寡核苷酸的一个组合，例如用六具体引物，它其实就是六个不同的核苷酸进行一个组合，那这样它理论上它有四点六次方可以扩增各种不同可能性的，就理论上我们所有的 rna 都可以进行一个反转录，知道吧？所以你看说明书上写了，就是说 可以从 rna 转录本的各个区域起始，并具有相同功能内转录的效率，那么这个他家就明确写了进进行优化的两个引物，使它的这个反转的效率更高，大概知道了吗？哦，明白了。 所以说反转路其实这一步还是比较简单的，我们只需要等着这个反转路的时间，我们镜头可以拉近一下，现在正在进行这个反转路，然后我们是他真实的步骤是五十度十五分钟，现在进正在倒计时，然后我们设计的是五十度的时间呢，他这个温控还是相对比较准的，现在是五十度，他实时测的温度是五十点一度，我们就等着时间结束就可以了。好， 翻转都结束了，老师我拿去做 q 了。好，继续做吧， q p r 都会吧，会会会。好，行，那么陌陌接下来就去做我们这个 q p r 了。那么关于 q p r 的 这个原理、操作步骤等相关的这个示意，且听我们下回分解。那么本期就分享到这里了，我们下次再见，拜拜。
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01:09查看AI文稿AI文稿如何通过对方的手机号来找到他的抖音号呢？假如你去放大镜里面去搜索呀，可能你是搜不到的啊， 不要着急，接下来我教你一个小窍门，只要你学会了这个小窍门呀，我们就能快速的在我们的通讯录里面找到所有朋友的抖音号了， 同时我们也能看到他发的所有作品，是不是非常的神奇？那废话不多说，我接下来给大家上实操，你不要眨眼睛啊，担心自己看一遍记不住的小伙伴们呢，你可以点赞收藏保存下来，你方便，有时间了就跟着一块操作吧。 首先我们先把好友的电话号码添加到通讯录里面，接下来点击右下角的我，然后看到这有个添加朋友没有，我们点击打开，这上面有个通讯录，我们点击一下通讯录，好，这里面就是我 我们所有通讯录好友的抖音号，你比如说想看他发的作品，点他头像直接进他主页里面看他的作品就可以，这里还可以添加他为好友，学会了吗？还有哪里不清楚的，欢迎评论区给我留言，关注我，我是静心，每天带大家翱翔抖音的知识海洋。
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