应该不会有人还在一个一个数细胞数量进行 trans well 清洗结果的统计吧? hi, 我是福尔甘小欧,本期和大家分享如何使用 image j 统计 trans well 清洗细胞数。 第一步,打开我们的 image j 软件,点击 fire open, 导入我们的 transfer 图片。第二步,选择 image j type, 将其更改为巴比特的黑白图形。 第三步,我们发现图片中有许多拍到的 trans well 的小孔,我们要尽量排除这些小孔。我们这里可以试着在 image adjust brightness or contrast 调整亮度和对比度,让背景 尽量干净,这一步也可以省略。第四步,接着选择 image adjust threshold 调整预值。 首先选择 b w, 然后移动滑块。我们调整的时候要随时看原图,尽量使得最终的所有细胞都变成黑色,不要出现细胞内部变空的情况。点击 apply 然后我们选择 allied particles, 在 size 这里设置识别颗粒的大小范围,一般设置为两百左右。 show 这里设置 outlines, 勾选 display results summarize exclude on edges 即可。 这时候每个图形上都会出现标记的数字,我们发现部分小孔图也被计算出来了,我们在结果框里可以找到其大小值。然后我们反过来重新选择 allys particles 调整技术的图像大小,确保小孔排除在外。再次点击 ok, 这时候统计获得的数值基本上就是视野内的细胞数了。 还有一点需要注意的是,我们要保证一组数据图都是在同样的设置条件下进行统计哦。最后再利用我们的作图神器 prison 噔噔噔噔将数据变成条形图。