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#高三生物怎么学
大家期待已久的引物的设计与选择终于出炉啦!大家快来看吧!
race巢式特异性引物怎么设计
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发布时间:2025-11-07 10:35
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RACE技术 RACE技术用来扩增基因的上游和下游序列#学习日常 #科研 #研究生 #科普
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不玩抖音
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引物❓️如何设计和订引物❓️视频版✨
引物是一种用于启动特定DNA或RNA合成的一小段单链核苷酸序列。在PCR、DNA测序、基因克隆、定点突变等技术中起到关键作用。关键作用。
✅引物是什么
✅引物作用原理
✅如何设计引物
✅在哪里订引物
#实验室日常 #博士 #生物实验 #研究生日常 #pcr
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Poppy读博版
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超详细的基因引物设计方法 超详细的基因引物设计方法#PCR #qPCR #引物设计
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浙大学姐手把手教你做“质粒构建”,一篇视频包会的 #研究生#质粒构建 #质粒 #实验教程 #ABclonal
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八一今天做实验了吗
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不会还有生物类研究生不会设计qPCR引物吧😋😋#考研 #研究生日常 #科研狗的日常 #干货分享
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实验室小卧龙
05:25
反向PCR如何选择引物?#高中生物 #浙江高考 #浙江生物网课 #浙江生物#PCR
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浙江生物潘老师
20:18
基因工程题目讲解篇① #李林生物 #新高考生物 #高中生物 #基因工程 #知识分享
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李林讲生物(进群领资料)
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#干货分享 带你第一视角完成PCR和核酸电泳实验 #研究生 #生物实验 #科研日常
378
孔丫
04:22
还不会配qpcr体系的兄弟姐妹👭来看这个视频,看完之后还有疑问的,我们评论区见!
[得意R]
从如何配体系,如何加样,如何计算,视频都有详细教学,只是视频时长有点稍长🥹🥹#科研 #医学实验 #QPCR #分子实验#小技巧
58
瑞瑞啊
07:07
PCR鉴定基因型(实验流程+原理+引物设计✅
已知基因突变位点之后,每次送测序鉴定基因型还要等结果反馈,其实自己在实验室就可以用PCR鉴定啦~
✅基因组提取
剪尾放入50mM NaOH中,95℃裂解15-30min,加入1/10体积ph=8的TrisHCl中和
✅双引物法
在敲除位点上分别设计WT、MT特异性上游引物,公共区域设计下游引物,分别扩增WT、MT通过琼脂糖凝胶电泳条带有无判断基因型
✅酶切法
在敲除位点上下游200-300bp分别设计上下游引物,PCR扩增后选择敲除前后酶切位点改变的限制性内切酶,酶切后进行琼脂糖凝胶电泳区分条带大小(看运气有时候未必有就只能双引物啦)
🔥注意事项🔥
需要提前摸索好扩增条件,结合测序结果得到特异性引物及扩增条件。需要大量鉴定时可以使用吉尔森多道移液器一次在96孔板中加入8/12个样品,十分钟完成96孔板体系配置~
#PCR #基因敲除 #科研大G #PipetmanL #超吉移液器
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Poppy读博版
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【Bing不难懂】科研界的巨头——赛默飞公司 #医升菌 #医学 #科研 #赛默飞 #科技公司
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糍粑妹坨
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科研狗的福音,“最强”文献翻译工具#大学生 #研究生 #科研 #论文 #教育
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晓龙说
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药学博士生日常#博士日常 #牛马disco #科研狗的日常
没有更新的日子也有在努力活着
好好做实验,好好吃饭和好好睡觉
29
Defocus不要偏
01:30
qpcr实验步骤视频版🔥
qPCR实验通过ΔΔCT法计算出flod change从而得到RNA在不同处理下的表达情况。那么实验过程是怎么样的呢?今天我们跟着视频一起来看一下吧~
✅实验准备
提前准备好cDNA(模板)、引物、SYBR mix、ddH20、耗材等
Tip:在冰箱里长期放置的试剂会挥发或析出沉淀导致液体不均匀,所以试剂都需要先涡旋混均后离心才可以打开使用~在使用时候要记得轴对称配平和拧上保护盖哦~
✅试剂配制
一般情况下配制20uL体系进行qPCR实验,为了节省试剂和样品,也可以配制成10uL体系哦~因为需要配制复孔(技术学重复)以减小误差,所以可以先将除了cDNA以外的试剂配完,分装到PCR板上,再逐一添加cDNA
试剂 体积
2x SYBR mix 5ul
引物F/引物R 0.25ul/0.25ul
ddH20 2.5ul
cDNA 单独加入2ul
✅PCR布板
每一行连续的三个孔(如A1、A2、A3)作为技术学重复,加入一模一样的体系和cDNA。可以在板子上先每三个画一条竖线区分。
给大家分享一个小技巧,做qpcr实验结果想要稳定就需要加样准确无误差的移液器,比如我们实验室就会单独放在一个实验台只进行定量实验,加样的时候可以边加样边抬手,让液体自然靠近pcr板,这样能够减少组内差异哦。
✅上机过程
✅数据计算
得到qPCR结果后,去除不符合实验要求的孔(点击omit),在三组生物学重复中使用ΔΔCT法计算相对表达量。可以在表格里直接计算哦~
#研究生日常 #实验室日常 #poppy的科研生活 #qpcr #医学生
504
Poppy读博版
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【科研干货】-手把手教你分分钟找到合适的PCR引物-上篇
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