人类的dna提取过程

dna 是人体遗传物质的控制中心，那么你知道 dna 是怎样复制的吗？首先， dna 是由两条互补的单链组成，呈现双螺旋结构。每一条 dna 单链由四种脱氧核糖和甘酸组成，两条链上的剪机遵循剪机互补配对的原则，这就意味着两条 dna 单链的方向是相反的。 我们把 dna 分子中含有磷酸集团的一端叫做五撇端，含有抢击的一端叫做三撇端。 dna 分子复制的第一步就是洁面 解链，是在解旋酶的作用下进行的。解旋酶在解链的过程中形成了一种叉状结构，叫做复制叉。在解旋酶的作用下形成的两个单链，各自作为模板去复制新的 dna 链。但是 dna 的复制是需要引物的，引物的形成是由引 物酶来完成。影物酶在 dna 的五撇端形成一段 rna 序列，影物的存在为 dna 的复制形成了起始未点。随后 dna 聚合酶与影物结合，沿着五撇到三撇端的方向形成 dna 序列。值得注意的是， dna 的复制只能从五撇到三撇端进行， 但是由于 dna 的两条单链是方向相反的，所以会形成一条连续的 dna 链，叫做前导链，一条不连续的链叫做滞后链。 之后链的模板链通过形成突换结构，从而与前导链的方向保持一致，才得以进行 dna 的复制。之后，链形成的一系列不连续的片段叫做钢琴片段， 每一钢琴片段都带有 rna 影物。待 dna 复制结束后， dna 聚合酶通过切除钢琴片段上的影物，通 是填补切除影物留下的空白序列，最后在 dna 连接酶的作用下重新形成连续的 dna 单列，这样一个完整的 dna 分子就形成了。新的 dna 分子中含有一条母链、一条星链，所以 dna 的复制又叫做半保留复制。

dna 含有四种剪辑，由字母 a， c， g 和 t 表示，两链是互补的，这意味着要一条链中有一个 t， 在另一条链中会有一个 a， 同样的一条链中有一个 c， 在另一条链上就会有一个 g。 每条链有一个五撇端和一个三撇端，两条链方向相反，这决定了每一条 dia 链是如何复制的。 dia 复制的第一步是分开这两条链，这一步由解悬为完成， 双链解开后形成复制叉。分开的每条链作为新 dii 链的模板，一种叫做引雾眉的眉启动这个过程，这种眉产生一小段。二 ni 作为引物， 以物结合的位点为 dia 复制的起点。一种叫做 dia 聚合酶的美与引物结合将合成新的 dna 链。 dia 聚合酶只能沿一个方向添加 dia 剪辑， 从五撇端到三撇端方向，其中一条 dia 链为引导链连续合成。 dia 聚合没从五撇端到三撇端逐一的添加剪辑。另一条链为滞后链，不能以这种连续的方式进行合成，因为它的方向相反。因此 dna 聚合酶只能在滞后链中合成一系列称为钢琴片段的短片段， 每个片段都以 rna 引物开始。 dna 聚合没按五撇端到三撇端方向合成一段 dna 片段，另一个引物结合在模板链的远端 合成另一个钢琴片段，并重复这一过程。一旦合成新的 dni 核酸，外切酶从两条 dni 中去除所有的 ini 以物，然后另外的 dni 剧和媒体 填补了 dna 上的空缺。最后 dna 连接没把两条链上的 dna 片段连接起来，形成连续的双链。因为每个 dna 分子都是由一条老的模板链和一条新合成的链组成，所以 dna 的这种复制方式叫做半保留复制。

of four chemical bases represented by the letters， a c g and t the two strands are complementary this means that wherever there's a t in one strand there will be an a in the opposite strand and wherever there's a c there will be a g in the other strand each strand has a five prime end and a three prime end the two strands run in opposite directions this determines how each strand of dna is replicated the first step in dna replication is to separate the two strands this unzipping is done by an enzyme called heliquez and results in the formation of a replication fork the separated strands each provide a template for creating a new strand of dna an enzyme called primase starts the process this enzyme makes a small piece of rna called a primer this marks the starting point for the construction of the new strand of dna an enzyme called dna polymerase binds to the primer and will make the new strand of dna dna polymerase can only add dna bases in one direction from the five prime end to the three prime end one of the new strands of dna the leading strand is made continuously the dna polymerase adding bases one by one in the five prime to three prime direction the other strand the lagging strand cannot be made in this continuous way because it runs in the opposite direction the dna polymerase can therefore only make this strand in a series of small chunks called okazaki fragments each fragment is started with an rna primer dna polymerase then adds a short row of dna bases in the five prime to three prime direction the next primer is then added further down the lagging strand another okazaki fragment is then made and the process is repeated again once the new dna has been made the enzyme exonuclease removes all the rna primers from both strands of dna another dna polymerase enzyme then fills in the gaps that are left behind with dna finally the enzyme dna ligaze seals up the fragments of dna in both strands to form a continuous double strand dna replication is described as semi conservative because each dna molecule is made up of one old conserved strand of dna and one new one。

dna 的粗提取与鉴定 所需实验材料，新鲜鸡血 二摩尔每升氯化钠零点一五摩尔每升氯化钠 体积分数为百分之九十五的酒精 体积分数为百分之零点一的甲醛二苯胺。 蒸馏水 商杯两桶 试管试管架， 一夜腔 机密电子秤 电炉 破碎细胞，提取鸡血细胞的细胞和物质。将制备好的鸡血细胞液量毫升注入到五十毫升烧杯中， 像烧杯中加入蒸馏水三十毫升， 用玻璃棒沿一个方向快速搅拌十分钟，使血细胞加速破裂。 然后用放有纱布的漏斗将血细胞液过滤到二百五十毫升烧杯中，取其绿叶， 提取 dna， 溶解细胞核内的 dna， 将物质的量的浓 浓度为二摩尔每升的氯化钠溶液五十毫升，加入到绿叶中， 并轻轻摇动烧杯十分钟，边摇边停，使其混合均匀。 这时 dna 在溶液中呈溶解状态，沿稍微内壁缓慢加入蒸馏水， 这时烧杯中有丝状物出现，继续加入蒸馏水，粘稠物会越来越多。当粘稠物不再增加时，停止加入蒸馏 流水。 将上述溶液用纱布过滤， 将纱布上的 dna 沉淀放入到烧杯中， 再用两摩尔美声氯化钠溶液溶解 dna， 用波棒搅拌均匀。 dna 的析出， 将含有 dna 的绿叶与等体积的冷却的百分之九十五的酒精混合。 加入酒精时动作要轻缓，以免加剧 dna 分子的断裂，不能形成絮状沉淀。 静置两到三分钟，溶液中出现丝状沉淀。 dna 的鉴定 用一夜枪响。烧杯中加入六毫升二本安士忌，二本安士忌要现配现用，棕色平为保存。二本安是有毒试剂，取用时要注意安全，佩戴手套。 再加入零点一升体积分数为百分之零点一的甲醛溶液， 取两支标号一二的二十毫升的试管，各加入两膜，每升的氯化钠溶液三毫升。用玻璃棒将丝状物加入其中，一号试管中震荡，丝状物溶解。 用一夜枪向两支试管中各加入三毫升的二分氨实剂， 混合均匀后，将试管置于沸水中加热五分钟。 待试管冷却后，比较两只试管中溶液颜色的变化。 一号管的溶液为蓝色，二号管的溶液为无色，这说明一号试管的物质里含有 dna。

dna 的半保留复制 dna 是怎样进行复制的呢？这就要从 dna 的结构说起。 dna 分子有两条单链组成， 这两条链按反向平行方式盘旋成双螺旋结构，两条链上的剪辑通过清剪连接成剪辑。对 dna 的复制是以清代 dna 为模板合成磁带 dna 的过程。复制开始时， dna 分子首先利用细胞提供的能量，在解悬酶的作用下把两条螺旋的 dna 双链解开。解开 开的每一段母链作为模板，在 dna 聚合酶等酶的作用下，利用细胞中有理的四种脱养核甘酸为原调，按照剪辑互补配对原则，各自合成与母链互补的一条子链。 模板链的解旋过程持续进行，新合成的子链也在不断的延伸。 同时每条芯链与其对应的模板链盘绕成双螺旋结构。 由于新合成的每个分子中都保留了原来 dna 分子中的一条链，因此这种复制方式被称作半保留复制。复制结束后，一个 dna 分子就形成了两个完全相同的 d dna 分子。新复制出的两个磁带 dna 分子通过细胞分裂分配到两个子细胞中去。

从某种程度上讲，分子生物学的所有研究手段都需要分离核酸。要研究不同生物的基因组，首先要制备纯净的、高分子量的基因组 dna。 我们在本次实验演示中使用三十毫克的猪肉样本以及纯化铸离心法试剂盒提取基因组。在实验开始前应清点试剂盒，其中蛋白酶 k 和 rna 消化酶应提前分装，低温保存，需要时再用。 洗涤缓冲液需要按说明书要求加入无水乙醇。接下来用干净的手术检把组织样本尽量剪碎放入离心管内。注意 适量的样本才能保证提取质量。皮肝、肾组织富含基因组不宜超过二十毫克，肌肉和皮肤则可以控制在五十毫克左右。向离心管加入链接缓冲液和蛋白酶 k， 利用涡旋震荡仪充分混匀。把离心管置于五十六摄氏度水域锅三十至六十分钟，裂解组织和消化蛋白。为了确保反应充分，可延长时间至过夜，以及间隔数次。取出离心管，上下颠倒 像消化液加入细胞和裂结缓冲液，混匀后静置十分钟，可以有效提高基因足产量。 接着把离心管内的全部溶液转移至吸附住内，离心蒸汽沸液 再次往吸附住内加入刚才的细胞和裂结缓冲液离心并扔弃肺液。 此时核钻已经吸附在膜上。我们接下来需要进行两次完全相同的洗涤。加入洗涤缓冲液、离心蒸汽沸液， 重复上述步骤一次，在第二次离心后应该空管再次离心一次，以便彻底去除残留的缓冲液。把吸附住转移到一个干净的离心管内。为了让残留的乙醇彻底挥发，可以室温静置二至五分钟。 最后一步是将吸附住膜直接滴入洗脱缓冲液，并静置二至五分钟。请确保洗脱缓冲液直接滴在膜中央，如果滴到管壁或边缘，将严重影响产量。把洗脱后的 dna 溶液重新滴在刚才的膜上，再次离心洗脱可以提高得率。 这就是用吸附柱法提取基因组的实验演示。感谢观看，欢迎关注视频号，实验老司机，我们下期再见！

dna 复制过程对于真核生物来说和 dna 的复制是随分裂间期染色体的复制而完成的。我们可以把 dna 复制大致分为解弦、合成、子链、重新螺旋三步，他需要模板原料、能量每等条件。 首先在细胞所提供的能量的驱动下， dna 双螺旋被解旋酶打开，然后以这两条单链分别作为模板，以游离的四种脱氧和苷酸为原料，在 dna 聚合酶等的作用下，按照剪辑互补配对原则，由五撇到三撇方向合成与模板互补的词链。 dna 边解弦边复制，两条子链在不断延伸的同时与各自对应的模板链盘旋成双螺旋结构。 半保留复制就是这样让 dna 分子由一得二复制出的。这两个完全相同的 dna 分子将通过细胞分裂分配到不同的自细胞里去。