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霉菌毒素检测本实验检测霉菌毒素,采用荧光定量检测卡法。以玉米中黄曲霉毒素 b 一、玉米赤霉稀酮呕吐毒素为例,实验仪器,敷浴器、毒素仪、粉碎机、 离心机、恒温震荡器、电子分析天平二十木筛药勺、两百微生一叶枪一千微生一叶枪二毫升离心管五十毫升离心管二十毫升两桶两个自封袋、兰口瓶两个记号笔。 实验试剂,无水乙醇蒸馏水稀释液一、实验准备一、打开毒素仪与敷浴器,注意敷浴器应提前打开, 至少预热三十分钟,预热时间不足会影响毒素测定结果。二、配置百分之五十的乙醇提取液本实验要用到四十毫升乙醇提取液,这里为了 方便我们配置六十毫升无水乙醇提取液,用五十毫升两桶量取三十毫升蒸馏水移入事先准备好的蓝口瓶内,再用另外一个五十毫升两桶量取三十毫升无水乙醇放入蓝口瓶,盖上瓶盖,摇晃蓝口瓶,使溶液混合均匀。温馨提示, 建议乙醇提取液现用现配。拿出粉碎机与玉米,将玉米放入粉碎机中粉碎两分钟,粉碎完成后,将二十木筛放在托盘上,将粉碎好的玉米放入二十木筛过筛,过筛完毕后将样品放入自封袋摇晃,自封袋内的样品 是样品混合均匀。二、毒素的提取,打开电子天平,放上称量纸,准确称取五点零零零零克的样品,至少精确到小数点后两位将称量好的样品缓缓倒入五十毫升里, 再用五十毫升两桶从兰口瓶中取出四十毫升乙醇提取液加入到离心管中,拧紧离心管盖子,并用手摇晃数次,使其均匀 打开恒温震荡器的电源。将装有样品的五十毫升离心管放入恒温震荡器,盖上盖子,设置震荡时间为 为十分钟。 温馨提示,震荡步骤也可以用二千五百转每分钟的涡旋仪震荡五分钟来代替。如果没有恒温震荡器和涡旋仪,也可以用手摇的方法代替, 震荡时间应在十分钟以上。注意震荡时间一定要足够,此步骤尤为重要。将震荡完毕后的五十毫升离心管放在离心管架上,静置五分钟,得到上倾液备用。也可以四千转每分钟离心三分钟。 三毒素的稀释用两百微生一叶腔吸取一百微生上氢液,移入到二毫升离心管中。 再用一千微生一叶枪移取九百微生稀释液加入到二毫升离心管内。如果只测定一种毒素,则一叶腔分别移取五十微生上氢液和四百五十微生稀释液。 打开离心机的电源,将离心管与事先准备好的非带侧管按照对称原则放入离心机中,设置离心机的转速为四千转每分钟,离心五分钟,制成带侧液备用。 温馨提示,玉米中黄曲酶毒素 b 一玉米赤酶硒酮、呕吐毒素的稀释液相同,可以通用四加样。 此过程分为浸泡、吹打、混匀、敷浴三个环节。浸泡打开敷浴器盖子,将检测条以及与检测条对应的微孔放入敷浴器的对应位置。用两百微生一页枪吸取两百微生代测液加入到微孔中,盖上黑色盒子,三十三点五摄氏度,静置五分钟。温馨提示, 黄曲酶毒素 b 一、玉米赤酶硒酮呕吐毒素的微孔不通用,注意微孔与检测条的顺序务必 一一对应,吹打混匀,用调整档位为三十微升的两百微升一页腔,反复吹打微孔内的待测液二十次后, 再盖上敷浴器的黑色盒子。三十三点五摄氏度,静置三分钟。敷浴,拿开敷浴器上的黑色盒子,缓慢将敷浴器合上,将黑色盒子盖在卡托上方,维持三十三点五摄氏度,敷浴五分钟。 五、读数将呼吁完成的检测条插入到读数仪卡槽中,输入账号密码, 选择好对应的卡托通道, 点击开始检测, 记录毒素检测结果,或者可以根据需要选择打印检测结果。 六、待测样品霉菌毒素超出毒素仪最高线的处理方法,将步骤二中上清液与百分之五十的无水乙醇提取液按照一比一的比例混合, 可用一千微生一叶枪移取五百微生上氢液加入到二毫升离心管中。再移取同等体积的五百微生乙醇提取液加入到二毫升离心管中。将离心管用恒温 震荡器震荡五分钟,或者用手摇十分钟以上来代替。接下来再按照步骤三、四、五的操作流程进行。最后步骤五中读数仪读出数值的两倍,即为毒素含量。

这边的话就是我们的中心化验室,我们做霉菌毒素的话就是在这一个屋,现在的话我进行一个样品,一个样品是做三种毒素, 下一步我们要对这三个样品进行一个稀释,像呕吐毒素的话,我们是用水进行一个稀释, 是我们的黄曲霉还有玉米赤霉系统,这是需要用我们的甲醇去进行一个稀释,所以呢这个我们需要在通风除下进行一个操作。 我们的样品稀释液已经加好了,在下一步的话我们手工镇摇五分钟,这是离心机,在离心机里面进行离心也是一个五分钟,这个工作台就是我们做 霉菌毒素的一个工作台,现在我是进行一个霉菌毒素我们这三种毒素的一个测试,然后我会把我们的稀释液和我们的这个样品混匀,下一步的话就进行一个点卡 计时五分钟啊,我们的这个馅已经显出来了,都是显阴性的,合格的,合格之后本上就需要登记一下,这个的话就相当于我们整车的玉米验收已经结束,可以正常开票了。我们的呕吐黄曲霉,玉米去霉系统,这三种毒素 包括我们的水分感官,然后全部合格了。下一步的话我们直接进行一个开票, 这个的话这一车玉米就已经开票结束了,然后我们给司机,司机直接拿去过磅。
