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质粒提取实验（一）：LB培养基的配制

实验目的

为质粒转化实验制备无菌的液体培养基，提供微生物生长所需的营养环境。

试剂与用量（100mL体系）

• 酵母粉：0.5g（提供维生素和生长因子）
• 蛋白胨：1.0g（提供氮源和氨基酸，ASR中“蛋白粉”为识别误差，正确成分为蛋白胨）
• 氯化钠（NaCl）：1.0g（维持渗透压）
• 去离子水：定容至100mL

配制步骤

1. 称量试剂

• 打开电子天平，将称量纸置于天平托盘上，归零后依次称取上述试剂，并称量后的试剂立即倒入洁净烧杯中。

2. 溶解与混匀

• 向烧杯中加入适量去离子水（约80mL），用玻璃棒搅拌至所有固体试剂完全溶解。

3. 定容与转移

• 将烧杯中的溶液沿玻璃棒缓慢倒入100mL量筒中，用少量去离子水冲洗烧杯2-3次，冲洗液一并倒入量筒，最后加去离子水至刻度线定容至100mL。
• 将定容后的溶液转移至锥形瓶中，轻轻震荡使溶液充分混匀。

4. 灭菌处理

• 用透气封口膜覆盖锥形瓶口，并用高压皮筋扎紧（确保灭菌时蒸汽可进入，灭菌后防止污染）。
• 将锥形瓶放入高压灭菌器，设置温度121℃，灭菌时间30分钟。

5. 保存与使用

• 灭菌结束后，取出锥形瓶，待培养基自然冷却至室温。
• 可立即用于实验，或密封后置于4℃冰箱中避光保存备用。