细胞胞吞的过程

动画展示动物细胞有丝分裂过程，在分裂间期完成了 dna 复制和相关蛋白质的合成，中心体也由一个复制成，两个细胞也有了适度的生长。 当一切准备工作完成后，细胞进入分裂期。分裂前期，染色体在细胞核内悄悄螺旋的时候，核仁区因没有松散的 dna 而无法再继续合成 rna， 最终解体， 紧接着核膜也消失了。染色体暴露在细胞质中，每条染色体的着丝率部位都连接着一些微管蛋白， 这些微管蛋白的另外一头是移动到细胞两极的中心体，形成两头尖中间骨的纺锤状结构，这就是纺锤体。 染色体螺旋化程度进一步增强，并受到纺锤体上微管蛋白的牵引，逐渐排列在一个平面上，这就是赤道板，也叫赤道面。赤道板与两个中心体的连线垂直，细胞进入到了分裂中期， 此时染色体形态稳定。排列规则是观察染色体结构和数目的最佳时期。 经过一些细胞周期蛋白的检测，如果每条啄丝粒部位都连接正确，就会发出信号，进入分裂后期， 此时分离酶会将粘连蛋白分解掉，导致啄丝粒分裂。碱胺染色单体分离，各自形成一条染色体，且这两条染色体所携带的遗传物质一模一样，从而实现遗传物质的平均分配。 当染色体到达细胞两极后，进入末期，染色体解螺旋形成丝状的染色体，同时核膜重新组装起来，形成两个新的细胞核。 注意，此时还是一个细胞。细胞质的分裂从后期就已经开始了，在赤道板的位置形成分裂沟，细胞膜逐渐凹陷，屹立在末期，结尾的时候屹立成两个细胞。

各位同学大家好，我是来自北京实验学校的老师田雅丽，我们今天一起来学习必修衣第四章第二节主动运输以包吞包吐 本节课的学习内容主要包括主动运输、包吞包吐和本章小结。通过学习本节课，同学们要能阐明主动运输的过程、特点和意义，举例说明包吞包吐的过程， 并且能够解释细胞膜控制物质运输的功能与细胞膜结构的关系。 上节课我们学习了一些小分子。物质和离子可以顺浓度梯度以被动运输的方式 进出细胞，比如水分子和氧气分子可以通过自由扩散进入细胞。葡萄糖分子可以通过载体蛋白协助扩散进入细胞， 钾离子和钠离子也可以通过通道蛋白协助扩散进入细胞。是不是物质进出细胞都是顺度度提度进行的呢？我们来看教材六十九页的问题探讨， 请同学们打开教材，完成任务。一、阅读教材提供的资料，探讨甲状腺上皮细胞吸收碘离子的方式。 人体甲状腺分泌的甲状腺激素在生命活动中起着重要作用，这是甲状腺， 它位于颈部甲状 软骨的下方，气管的两旁。这是甲状腺氯泡上皮细胞。很多甲状腺氯泡上皮细胞围绕形成了甲状腺氯泡，这里是合成甲状腺激素的地方，他们外面布满了毛细血管。 碘是合成甲状腺激素的重要原料。甲状腺氯泡上皮细胞内碘的浓度比血液中的要高二十到二十五倍。也就是说，甲状腺氯泡细胞可以从碘浓度低的细胞外运输碘到碘浓度高的细胞内？ 在这段资料的后面，教材提出了上面这些问题，同学们可以按暂停键思考一下。 好，下面同学们跟老师一起来探讨这些问题。第一个问题，甲状腺氯泡上皮细胞吸收点是通过被动运输吗？ 可能很多同学都想到了，这一定不是被动运输，因为被动运输是顺浓度剔度进行的，既物质从浓度高的地方运输到浓度低的地方，而甲状腺氯泡细胞吸收碘离子是逆浓度剔度的。 第二个问题，联想逆水行舟的情形，甲状腺氯泡上皮细胞吸收点是否需要细胞提供能量？ 逆水行舟显然消耗能量，那甲状腺滤泡上皮细胞逆浓度剔度吸收碘离子应该也需要细胞提供的能量。逆浓度剔度运输物质的方式 是普遍存在于细胞中的吗？我们来看下面这些资料。 小肠液中氨基酸、葡萄糖的浓度远远低于他们在小肠上皮细胞中的浓度，但他们仍然能被小肠上皮细胞吸收。 人红细胞中钾离子的浓度比血浆高三十倍，轮藻细胞中钾离子的浓度比周围水环境高六十三倍。 人神经细胞未兴奋时，细胞外的钠离子远高于细胞内。还有很多这样的例子，我们不能一一列举。所以说物质逆浓度梯度进出细胞的运输方式是普遍存在的，叫做主动运输。我们下面来 完成任务。二、通过观察主动运输示意图，试着概括主动运输的过程。 从图中我们可以看到细胞运输的物质浓度，细胞内高于细胞外，细胞膜上有运输这种物质的载体， 它能将这种物质逆浓度梯度运到细胞内，因此这一过程消耗细胞化学反应释放的能量。 载体是如何将物质从低浓度一侧运输到高浓度一侧呢？我们下面再来看看主动运输过程的模拟动画。 在这个画面中，我们能看到细胞外的钠离子浓度高于细胞内， 而细胞内的假离子浓度高于细胞外。那么细胞是如何内浓度梯度转运这两种离子的呢？ 首先，细胞中的三个钠离子与载体蛋白结合，细胞中的能量物质 atp 最外侧的磷酸集团携带能量与载体蛋白结合，引起载体蛋白空间结构发生改变， 钠离子脱离载体蛋白被转运到细胞外。同时两个假离子与载体蛋白结合， 磷酸集团从载体蛋白上脱离下来，引起载体蛋白空间结构发生改变，导致钾离子被转运到细胞内。请同学们拿出学习任务单，我们一起来对主动运输进行概括。 逆浓度梯度进行的跨膜运输需要载体蛋白的协助，同时还需要消耗细胞内化学反应释放的能量，这种方式叫做主动运输。 同学们还记得上节课学习的协助扩散的运输方式吗？与主动运输相同的是，协助扩散也需要载体。 那么这两种运输方式到底有哪些异同呢？下面我们来完成任务三，比较协助扩散和主动运输的异同。填写学习任务单， 同学们可以暂停一下来进行观察。好，同学们，请和老师一起来进行比较 主动运输的过程。与协助扩散相同的是，物质在逆浓度梯度跨膜运输时，也需要载体蛋白协助物质分子和载体蛋白的特定部位相结合， 并且这些载体也只能运输离子和小分子。与协助扩散不同的是，主动运输的过程中，物质是逆浓度剃度运输的载体，蛋白的空间结构的变化需要细胞内化学反应释放的能量的推动。 同学们是否已经将任务单上的比较表填好了呢？我们一起来核对一下。 协助扩散和主动运输都是转运离子和小分子的过程，都需要转运蛋白，但是协助扩散是顺 浓度剔度的运输，所以不消耗细胞化学反应释放的能量。而主动运输是逆浓度剔度的运输，所以消耗细胞化学反应释放的能量。 下面我们回到本节课一开始提到的甲状腺氯泡上皮细胞吸收点离子的过程，科学家把这一过程化成下面这样的示意图。 从这张示意图中我们可以看到，运输点离子的载体也同时运输钠离子，在这个过程中不消耗化学反应释放的能量。 但是碘离子的运输借助了钠离子的浓度梯度适能，而维持钠离子的细胞外高于细胞内的浓度梯度，就需要消耗细胞化学反应释放的能量。 把顺浓度梯度运进细胞的纳离子，再逆浓度梯度运出细胞。因此这样看来，甲状腺滤泡上皮细胞吸收点最终也是消耗细胞化学反应释放的能量，是主动运输的过程。 这样的例子还有不少，比如小肠上皮细胞吸收葡萄糖。所以说，判断某种离子或小分子是否以主动运输的方式进出细胞，需要确认细胞在这一过程中是否消耗了能量。 细胞不仅可以主动吸收生命活动所需要的离子和小分子，还能通过主动运输排出很多对身体有害的物质。比如生活在海边的动物，如海鸥， 他们生活在海边，以海水中的动物为食，他们吃了这些食物后，体内盐浓度升高，会危害正常的生命活动。幸运的是，他们进化出了盐腺这样的结构， 通过眼线细胞的主动运输排除多余的眼，以维持体内细胞正常的生命活动。 神奇的是，很多生活在海边或者盐碱地的植物也发展出这样的能力，如桐花树，它也可以通过沿线主动排出体内多余的盐分。 可见，主动运输这种物质转运方式是生物能够适应多种多样环境而生存下来的一个重要的细胞学基础。所以，主动运输的意义在于， 主动运输普遍存在于动植物和微生物细胞中。通过主动运输来选择吸收所需要的物质，排出代谢废物和对细胞有害的物质，从而保证细胞和个体生命活动的需求。 这里需要提醒同学们注意的是，不同离子或分子的大小和性质不同，所以不同转运蛋白质的空间结构差别也很大。一种转运蛋白通常只能运输一种或一类离子或分子，比如 氢离子载体蛋白只能转运氢离子，磷酸盐离子载体只能转运磷酸盐离子。而不同细胞的细胞膜上的转运蛋白的种类和数量是不同的，因此对 同一物质的运输能力也是不同的。科学家们研究这些转运蛋白的结构有什么用呢？请大家来看一下教材期事业与社会联系栏目中的内容，同学们可以暂停一下。 好同学们通过阅读知道囊性纤维病的主要病因是患者支气管上皮细胞表面转运粒离子的载体蛋白的结构和功能发生了异常，类似的疾病还有很多， 解析这些转运蛋白的结构将有助于找到治疗疾病的办法。 我们来看奥美拉坐治疗胃酸过多导致胃溃疡的例子。首先来了解一下胃的酸性环境 是如何制造出来的。胃壁的粘膜层主要有三种细胞，分别标注为红色、紫色和浅粉色。其中这种标注为浅粉色的细胞叫做 b 细胞，他是胃酸的制造者。我们把它放大来看。 b 细胞朝向胃腔的膜上分布有运输氢离子的载体氢钾泵， 它通过消耗细胞化学反应释放的能量，即 atp 中的能量。逆浓度剃度，将细胞内的氢离子运输到细胞外。 同时这一侧的细胞膜上还有氯离子通道，它可以顺浓度剃度，将氯离子运出细胞，这样胃酸就形成了。正常情况下， 胃酸为什么不会伤害胃黏膜呢？近年来，粘液碳酸氢盐屏障概念的提出，至少部分的回答了这个问题。这主要是因为胃黏膜上皮覆盖有不可溶性的粘液凝胶， 凝胶的粘稠度约为水的三十到二百六十倍，氢离子和碳酸氢根离子在粘液层内的扩散速度明显减慢。 因此，胃腔内的氢离子在向上皮细胞扩散的过程中，不断与从上皮细胞分泌的氢碳酸氢根离子遭遇， 两种离子在粘液层内发生中和，在未粘液层存在一个 ph t 度，粘液层 靠近胃腔面的一侧呈酸性， ph 为二左右，靠近上皮细胞的一侧呈中性， ph 值为七左右。 因此，粘液碳酸氢盐屏障能有效的阻挡氢离子向胃粘膜细胞方向扩散，保护了胃粘膜免受氢离子的侵蚀。粘液深层的中性 ph 环境还是胃蛋白酶丧失了分解蛋白质的作用。 不过如果胃酸分泌过多或粘液产生减少，屏障受损导致粘膜自身消化，就会形成胃溃疡。在了解了胃酸过多会导致胃溃疡后，科学家通过研究氢离子在 体的空间结构，发现奥美拉坐可以与背粘膜细胞的氢离子载体结合，即氢钾泵的特定部位相结合。阻断胃酸分泌的最后步骤 是 b 细胞内的氢离子不能转运到胃腔内，从而来缓解因为胃酸分泌过多而引起的胃痛、胃部烧灼感、反酸等胃溃疡的症状。 这就是奥美拉唑能够治疗胃溃疡的原因。现在同学们是不是体会到科学家对这些蛋白质结构的研究很多时候是研发药物治疗疾病的常用方法呢？下面我们来看。任务四， 唾液腺细胞能分泌淀粉酶胰岛细胞能分泌胰岛素，淀粉酶和胰岛素能通过自由扩散协助扩散或者主动运输运出细胞吗？请你根据细胞膜的结构特点做出分析。 可能很多同学都想到了，淀粉酶和胰岛素都是蛋白质，是生物大分子，因此无法像水分子或者二氧化碳分子这样通过自由扩散穿过细胞膜的脂霜层 协助扩散和主动运输都是需要细胞膜上的转运蛋白的运输方式是用来运输离子和小分子的，也无法转运这些大分子。那么这些大分子是怎么进出细胞的呢？ 我们首先来回忆一下这些分泌蛋白合成和运输的过程。 淀粉酶和胰岛素这些分泌蛋白首先由附着在内脂网上的核糖体合成，然后经过内脂网和高尔基体的加工，包裹在囊泡中，移动到细胞膜的附近， 最终囊泡和细胞膜融合，这些大分子就被分泌到细胞外了。这种大分子物质排出细胞的过程叫做包土 细胞，不仅能排出大分子，也可以吸收大分子。我们来看这张大分子进细胞的电竞照片。首先是细胞膜发生内线，把大分子包围在 在这个凹陷里，然后凹陷的口逐渐缩紧，最后形成小囊泡脱离细胞膜进入细胞，这个过程被称为包吞。 有的同学可能要问了，细胞外的大分子那么多细胞怎么识别哪种大分子是自己需要运进细胞的呢？问的好，下面这些示意图是科学家们对此进行研究的结果。 细胞膜上有能够识别大分子的蛋白质，比如涂上这些蓝色分子，它可以和紫色的大分子颗粒相结合， 然后这部分细胞膜就发生内腺，形成小囊泡，并且和细胞膜分离，这样细胞就通过包吞 吸收了他需要的大分子。所以包吞的过程需要细胞膜上的蛋白质对选择吸收的大分子进行识别，并且小囊泡的形成和移动需要消耗细胞呼吸释放的能量。包吞和包吐也是一种跨膜运输的方式。 需要同学们注意的是，包吞作用也并不都是需要细胞膜上蛋白质进行识别的。在这张示意图中，细胞将包外液滴吞入柔细胞膜内腺形成的小泡中， 通过这种方式，细胞获得溶解在水中的溶质分子。下面请大家再来看两个单细胞生物进行包吞和包土的例子。 变形虫通过包吞摄取单细胞生物等食物，经过细胞内消化后，剩下的废物经由包土排除，细胞立即内。变形虫通过包土作用分泌蛋白分解酶溶解人的肠壁细胞， 通过包吞作用吃掉肠壁组织细胞，并引发阿米巴力剂这种病原体通过饮食传播。这就提醒我们要注意饮食卫生，培养良好的个人卫生习惯来预防阿米巴力剂等传染性的疾病。 在人体内也有类似于变形虫的细胞，能够把死亡细胞的碎屑或细菌吞噬到细胞内，他们就是我们身体的卫士，白细胞。 这是白细胞通过包吞作用吞噬细菌，这个四周伸出很多凸起的细胞就是白细胞，这些颗粒状的就是细菌。 我们下面再来看一下显微镜下的动态过程， 看这白细胞对细菌穷追不舍的样子是不是很感动，我们要好好感谢这些帮我们清除病原微生物的白细胞。 下面我们来看任务五，请同学们概括包吞包吐这种跨模运输的方式，并记录在学习任务单上。 好，请同学们核对自己的学习任务单是否概括了以下的要点， 细胞通过包吞包吐将大分子运入或运出细胞，这需要细胞膜上的蛋白质参与并消耗细胞内化学反应所释放的能量。 在这个过程中，细胞膜的内腺和囊泡与细胞膜的融合都离不开磷脂双分子层的流动性。 好，下面我们来完成任务。六、请同学们尝试以概念图的方式将本章所学内容总结在学习任务单上。 请同学们核对一下你的总结是否包含以下内容。我们知道，细胞是一个开放的生命系统，随时与外界进行物质交换。细胞是怎样保证吸收有用的物质，排出有害的物质呢？ 首先，细胞膜磷脂双分子层有阻隔作用，物质不能随意进出，只有一些不带电核的小分子， 如水、氧气、二氧化碳和甘油、乙醇等可以自由扩散的方式进出细胞离子和较小的有机分子， 如葡萄糖和氨基酸等。跨膜运输必须借助转运蛋白，一种转运蛋白往往只适合转运特定的物质，如假离子通道只能协助转运假离子 钠钾泵这种转运蛋白只能主动运输钠离子和钾离子。因此，细胞膜上转运蛋白的种类和数量或转运蛋白空间结构的变化对许多物质的跨膜运输起着决定性的作用， 这也是细胞膜具有选择透过性的结构基础。像蛋白质、多糖这样的生物大分子通过包吞或包吐进出细胞，其过程也需要膜上蛋白质的参与识别，更离不开 细胞膜的流动性，可见细胞膜的结构决定了细胞膜控制物质进出的方式，具有选择透过性。 好了，同学们，今天的课就上到这里，各位同学再见！

hello， 同学们，大家好，今天呢，我们接着来讲解必修一基础知识判断啊，第十二节课， 我们这一节课呢，主要讲的应该是主动运输部分与包头包土。首先我们来看一下第一题，小分子以自由扩散的形式通过细胞膜 啊，那么这句话对不对呢？我们讲小分子是不是就是自由扩散？我们讲不一定啊，比如说我们讲葡萄糖，葡萄糖也是一个小分子，那葡萄糖 我们讲要注意的是，他进入红细胞的时候是什么？是协助扩散，他进入小肠上皮细胞的时候是什么？他是主动运输，那么他一定是自由扩散吗？所以讲小分子是自由扩散进出物细胞膜的，那这个说法肯定是错的。 第二个，以胞吞或胞吐的形式进出细胞的，一定都是军事大分子者，那这个肯定错，为什么呢？我们讲神经递质， 包吞包吐一般来讲是大分子物质，但是神经递质啊，它是小分子，这是我们选择性必修一讲的神经系统的兴奋性。那里讲到的它是什么形式？小分子的，它是以包土的形式进行来释放出这个神经细胞的突出前膜的， 所以呢，这个就是错的。第三个，同一种物质进出不同的细胞，运输方式可能不同， 这个对的，比如说我们讲，呃，就拿神经递质举例子吧，我们讲神经递质，肝胺酸如果充当的是神经递质从突出前膜释放的时候，它是包土的形式， 那么如果肝酸进入小肠上皮细胞，它又是主动运输的形式，那你看进入不同的细胞是不是运输方式是不是不同？那还有什么呢？还有刚才讲的这个葡萄糖进入红细胞是协助扩散进入小肠上皮细胞，是主动运输 啊，所以呢，我们讲可能不同，没问题啊。第四题，以主动运输的方式进入细胞的物质都依赖于那个载体蛋白 浓度运输，我们讲通常是逆浓度梯度运输的，并且在运输过程当中，我们讲会消耗掉能量，并且需要转运蛋白的协助。那么在这里呢，我们稍微讲一下转运蛋白，转运蛋白呢，在我们物质运输的时候，主要分为两类，一类呢称之为叫通道蛋白， 还有一类呢，称之为叫载体蛋白。我们简单的介绍一下通道蛋白呢，通常说他自身的构象，通常啊自身的构象不会发生改变啊，一般不能够与物质发生结合，载体蛋白呢，自身构象能改变，能与物质发生结合。 然后呢，通道蛋白能够进行哪一种跨膜运输方式，一般认为呢，是协助扩散，那个主动运输能够进行的应该是那个载体蛋白用到的载体蛋白，但是载体蛋白他也可以进行协助扩散， 所以我们讲用到的那个载体蛋白的不清楚是哪一种跨膜运输方式，但是主动运输他用到的却一定是载体蛋白，所以这里来讲呢，是没有问题的 啊，这个是对的，但是刚才啊，我讲了一下，因为这个点其实书本上没有明确的讲啊，通道蛋白一般认为运输物质的过程当中，自身的构想并没有发生改变 啊，比较老的说法呢，确实讲的不改变，但是现在有一些材料当中，书本上已经删掉了，没有讲他改变，也没有讲他不改变，我做到了。有些题目当中讲他自身构想去改变，那么如果题目当中讲改变，那就改变啊， 再来看一下。至于清水当中，一段时间之后，洋葱的鳞片叶表皮细胞不再吸水，与细胞壁的作用有关系。那么我们讲，比如说我画一个植物细胞， 那植物细胞有细胞壁，那细胞壁的里面呢？我们讲有细胞膜，那如果说外面是清水，那外面的浓度是不是一定是低浓度？水分是不是会被液泡给吸收？ 那细胞会不会无限的膨胀，最终会胀破呢？那倒不会，是不是起到细胞壁起到了一个支撑与保护的作用，所以它将与细胞壁的这个作用有关，那这句话呢，肯定是没问题的。对的啊， 无界的离子的跨膜运输方式不一定需要消耗能量，那这个就涉及到来终结一下吧。跨膜运输啊，简单的来终结一下啊， 给大家一些跨步运数里面要背的一些案例。呃，来简单讲解一下。首先呢，我们讲啊，有主动运数，也有被动运数，被动运数是不是包括了自由扩散？自由扩散有哪些案例是自由扩散？第一气体， 除了气体还有什么？还有脂溶性物物质，小分子物质，比如甘油，脂肪酸，还有什么？还有我们讲少部分的水分，绝大部分的水分是什么？我们讲是协助扩散，那水分呢？协助扩散第二个 神经细胞的钠离子内流和钾离子外流是协助扩散第三个葡萄糖进入红细胞，就是前面举的案例。 那主动运输有什么呢？主动运输我们一般认为是叫葡萄糖进入小肠上门细胞，但是一般认为除了进入红细胞，通常都是主动运输。第二种常见到的例子呢，叫绝大部分的离子的运输方式，一般默认为呢都是主动运输 啊，当然具体还有一些东西结合到呃题目的内容，给到一些材料来判断，那么就具体再判断，然后还有呢，就是包吞鱼包吐啊， 那包吞包吐呢？我们讲绝大部分来讲是大分子物质，那除除了我们讲生物大分子的物质呢，还有什么？还有神经递质这样子的小分子物质，前面已经讲过了，所以呢，他讲五只眼 不一定会消耗能量，那这句话呢就完美没问题。对的啊，酒精进入小肠泥模式，协助扩散，酒精啊，它属于脂溶性的物质，所以属于自由扩散。里面的案例，它是自由扩散啊，所以是错的。 原料中的葡萄糖进入肾小管上皮细胞，我们讲是主动运输，那么我们讲葡萄糖刚才讲过一句话，进入红细胞的时候呢，是协助合上进入其他的细胞，我们讲小肠上皮细胞是主动运输进入这里的肾小管球合管细胞呢，也是主动运输 啊，所以这里呢，我们讲是那个主动运输，它是对的。当然我们讲这里，如果要讲那个呃原料当中的水分子，你要看清楚， 那被盛小罐九个罐重汽收，那这里他就是写作扩散啊。然后这里呢，我们就讲完了，同学们，再见。这节课就讲到这了，拜拜。

今天我们做细胞扩增，准备好完全培养基、培养瓶、十五毫升离心管等材料。此外，提前打开细胞，密度在百分之七十到九十就可以扩增了。打开超镜台开始操作。我们先吸走旧的培养基， 再加入一毫升移媒进行消化，过程中轻轻摇晃，均匀分散移媒 later 细胞变为流沙状，说明时间到了。 加入一毫升完全培养基，终止消化。轻轻吹打分散细胞，注意看一毫升，因为加一毫升完全培养基等于二毫升溶液。如果做扩增，那就把二毫升都吸取离心，如果同规格四分之一传带，那就只吸取五百微升离心就可以， 离心参数一般为八百转，每分钟离心，五分钟离心结束。取出离心管， 往新的培养瓶里加入十五毫升完全培养机，然后吸走十五毫升离心管里的废液，注意不要吸到细胞。再用适量体积的完全培养机轻轻吹散细胞，全部转移到培养瓶里， 轻轻摇晃细胞，让细胞均匀分布，放回去继续培养。 常用的扩增换算方法，一般一个六孔板的其中一个孔刚好可以扩增到一个 t 二十五平，一个 t 二十五平也刚好可以扩增到一个 t 七五平。一个十厘米对血刚好可以传扩增到一个十五厘米对手。

巨噬细胞是免疫系统中的一种重要细胞，它们的主要功能是吞食和消化入侵的细菌、病毒和其他有害物质。当细菌进入人体后，巨噬细胞会迅速识别并靠近它们。 巨噬细胞表面有许多受体，能够识别细菌表面的特定分子，从而触发吞食过程。 巨噬细胞会伸出尾足，将细菌包裹起来，形成吞吐体。随后，巨噬细胞会将吞吐体与溶媒体融合，释放消化酶将细菌分解。这一过程不仅能够清除病源体，还能激活免疫系统，引发炎症反应，进一步增强肌体的防御能力。

大家好，今天我们来看一下包吞包吐对小分子物质、水等这些物质，它们通过的是啊被动运输或主动运输来进行运输， 但是对于蛋白质、多糖这样的大分子物质的运输是无法进行被动运输和主动运输的。大分子物质的运输方式是包吞与包吐， 那么需要注意，有的小分子物质运输方式在也会是包吞与包吐，如神经递质释放过程。 那么包吞包吐我们可以看下这个概念。当细胞摄取大分子时，通常是大分子先与膜上蛋白质结合，从而引起这部分细胞膜内陷，形成小囊 包围着大分子，然后小囊从细胞膜上分离下来，形成囊泡进入细胞内部，这种现象叫做胞吞。以此类推啊，那胞吐是细胞将大分子物质排出细胞外， 那胞吞、胞吐均与膜蛋白有关，而这个膜蛋白不是再接蛋白，它是一种识别蛋白。 那么包吞包吐过程中需要消耗能量啊，需要注意，那么包吞形成的囊泡在细胞内可以被溶媒体降解，与溶酶体内的消化酶的消化作用有关。 包吞包吐过程中啊，它的实现是膜结构特点体现，也即膜具有一定流动性，通过膜的流动来实现包吞包吐。 而对于细胞来说，细胞膜的功能特点是选择透过性，选择透过性的结构基础是转运蛋白的种类和数量。

一分钟理解一个高中生物知识，今天讲的是细胞自适应。细胞自适应就是真核生物理细胞通过融媒体把细胞内的物质降解和周转的过程，它可是维持细胞稳态的重要机制哦。就好比细胞是个小房间，细胞自适应就是定期来打扫卫生的阿姨。 细胞自适应有三种分类，聚自适应就像用大袋子把东西装起来扔掉。微自适应呢，是融媒体直接把不要的东西吃掉。分子伴侣借导的自适应，就是有专门的人把特定的蛋白送进融媒体降解。细胞自适应的过程很复杂，包括自适应起始、自 适体形成、自适体与融媒体融合及内容物降解等步骤。它的功能可多了，能清除受损的细胞器和错误折叠的蛋白，就像把房间里坏了的家具 和垃圾都清理掉，让细胞内环境保持稳定。它还参与细胞发育与分化，就像在细胞成长的过程中，帮助它变成更好的自己。在应激反应中，比如饥饿的时候，它会分解大分子物质，提供能量和原料，就像把家里的旧东西卖掉换钱买吃的。细胞自习和疾病也有密切关系。在癌症中，它有时候能抑制肿瘤， 有时候又会促进肿瘤生长。真是个两面派。在神经退行性疾病中，它要是出了问题，错误蛋白就会累积导致生病。它还能参与细胞对抗病原体的过程，把病原体都消灭掉。

分钟带你理解细胞呼吸的全过程。我们今天看一下细胞的呼吸，我们都知道我们的细胞呼吸肯定分为有氧呼吸和无氧呼吸，对吧？无论是有氧呼吸还是无氧呼吸，我们的实质，我们最根本的目的，它是不是让有机物在细胞内去进行氧化分解，来生成二氧化碳和其他一些产物，最终的目的是释放能量，对吧？光和作用是相反的，对吧？光和作用最终是生成有机物。 我们呼吸是消耗有机物，那我们的这款分解它是在体内的，而且它是经过酶的一个分解，逐步的来释放能量。看下有氧呼吸， 我们刚才说了呼吸是对有机物去进行分解，那我们这里的有机物是什么？就是这个东西，这个东西是不是葡萄糖？我们的第一阶段就是对葡萄糖进行初步的一个分解，那我们初步的分解把它分解成什么了？我们把它分解成这个东西叫丙酮酸， 我们通过初中的化学我们可以知道我们这个化学反应式它是不是要配平啊？我们看左边这个是六个碳啊，这三个碳，六个氧，这边三个氧，那我叔叔把这里写成二，他大致的这个碳和氧就平了。嗯，那现在我们差的什么？差在中间的氢，对吧？没有十二个氢，那右边现在是八个氢，那我们怎么办？是不是加四个氢就可以？我们这里的这个氢我们叫它什么？我们叫它还原氢， 这里的还原氢它其实本质是什么？它是这个东西 d h， 我 们也叫它什么？还原性辅酶一，它是还原型辅酶一就可以了，那我们后面还会提到的哈，从这个过程它也会生成什么能量，但是少量能量， 这个能量它包含什么？它分能量都是以热能去丧失的，那只有少少部分的我们的能量储存到了 atp 中啊，这就是我们的第一阶段，还有个别名啊，叫做糖酵母，名字你有印象就可以了啊。那葡萄糖在哪里去进行分解？我们第一阶段在细胞质机制里面， 这这个反应也需要我们葡萄糖第一阶段分解成丙酮酸，那我们第二阶段是不是应该从丙酮酸开始了？此时第二阶段我们的反应场所是哪里？是线立体机制，就是说我们的丙酮酸进入线立体机制开始了，我们要回接第二阶段的反应啊。第二阶段我们还加上了水， 我们第二阶段我们已知的是用丙酮酸去进行反应，那我们上面这里是不是二倍的？那我们这里也是两个丙酮酸生成的是什么？二氧化碳，我们看这两倍丙酮酸，这里是不是有六个碳呀？看到吗？那六个碳，那我们这里是不是也要配六个碳？ 我们再看氧氧，我们这里是十二个氧，那前面这里是六个氧，对吧？我们的水这里是不是也要给六个氧啊？这里水，这里加六。 好，我们再计算一下，通过配平啊，前面有八个氢，这里有十二个氢，二加八等于二十，所以最后我们要在后面补二十个。什么还原氢，二十个，这个氢仍然是什么？ n、 a、 d、 h， 也就是还原型辅酶一，它同时同样的需要酶去进行一个什么催化啊？我们第二阶段它也可以叫 t c a 循环，或者叫三嗖酸循环， 我们叫柠檬酸循环。我们先看他这个名字叫什么循环呢？其实我们的有氧呼吸第二天他是不是就应该是个循环？像我们光反应一样啊？是一个循环，那他这里命名柠檬酸循环，肯定要有柠檬酸啊，他柠檬酸是一个循环里的中间产物，那这里我们后面拓展的时候会一起讲 我们的我们第二圈这里是不是也要释放能量，他也是少量能量啊？再来我们远呼吸，第三阶段我们的反应是什么？我们是不是二阶段，我们反应完之后的二氧化碳和什么青啊？我们说二氧化碳是不是被释放出去了？是不是他其实就剩还原青了？那我们第一步的远呼吸中是不是也有还原青啊？可以看这里，这里有二十个，那我们一共有多少个？ 是不是二十四个黑色的还原清啊？加上我们这一步进行了什么氧气来反应，那我们生成了什么？我们看有清有氧，很明显我们生成了水，对吧？我们再把它配一下平，前面二十四个，那这里是不是十二个水？那十二个水这边就十二个氧，那前面这是不是六个？那我们就配平了，那这个过程中放出大量能量， 那同样的我们这个结构，它是不是双层膜的啊？这样子，我简单画一下， 那内膜它是不是会凸出来很多，形成挤，对吧？我们在内膜上去进行这样的一个反应，氧气和氢环境这样的一个反应，好吧，这就是第三阶段，那同时我们第三阶段也有名字，量子传递、链化、磷酸化。 一会我们拓展也会讲，我们说这三个阶段是不是第一阶段和第二阶段都只产生了什么少量的能量？我们第三阶段产生了大量的能量，我们看氧呼吸，他是不是彻底的进行氧化分解了，释放了能量，这些能量他的去向什么样子？说是不是大部分以热能形式，暂时少部分不存在 atp 中？ 好，那这就是我们的有氧呼吸，那我们看一下呼吸的拓展内容，也就是有氧呼吸的二阶段，我们只有三个名字啊，刚才也说了，他竟然能叫柠檬酸循环，首先肯定是有个循环的，它的中间物之一，对吧？就是柠檬酸写错了 酸循环，那我们看一下啊，大家把图给大家放到这里，大家可以去借鉴的去看，然后用材料题中可以见到，那我大致的写一下有氧呼吸第一阶段产生的丙酮酸他进行了什么，他先进行分解，形成这个东西， 一酰辅酶 a 啊，这个中间产物由它开始我们进行这个循环，循环最后还是成了一酰辅酶 a， 那 它为什么叫柠檬酸循环？我们可以看第二个中间产物就叫柠檬酸， 到了第二个产物叫显乙酸，大家也可以有个印象，它在材料题中的出现的频率也是蛮多的。循环的这个过程其中一步释放二氧化碳，并且很多步骤。 d 正和氢离子生成的 nad， 我 们刚才说了 nad 是 什么？ nad 是 还原氢啊，进行辅酶 e 一， 也就是我们的还原氢，也就是我们第二阶段的产物之一啊。氢，那 nad 正是 就是氧化型辅酶，这个大家怎么记？那我们在呼吸里面全部都是没有 p 的 啊？ a d p h 和 n a d p 证全部都是光核里面的，那他们代替的全部都是辅酶二，那我们呼吸里面就是辅酶一，然后再带这个加号的 氧化型，那带这个 h 的是还原型啊，我们这个过程中很多啊，左步骤，那有些步骤就会生成 n d， h b， 它是一个循环，它叫 t c a 循环，酸醋酸循环，或者说柠檬酸循环，哈。第二个拓展就是营养呼吸的第三阶段，我们说什么电子传递链氧化、磷酸化，我们给它简化了，我们看下它的这个是什么样子的？我现在画的这个是线粒体的膜， 下面这个是先写内膜，上面的是腺体的外膜，对吧？腺体双层膜，那正常内膜是一直向我这里画的，他是这样弯的，但是我们给他简化，那我们说我们的这个反应是在内膜上进行的，所以我们的内膜上都有一些蛋白质。首先我们说第三阶段他的反应之一是不是这个形啊？这个东西他也是什么 n a， d， h， 所以 nadh， 现在这上面反映它形成 nadd 正和什么氢离子，那这里我们看它这个分这两个之后它还会生成两个电子，你看后面这里啊， p 正，它是一个带正电的，那这里也是带正的，那它正好两个负的啊，被激发到这个规律的一个状态，它就进行传递传，它利用我们这个子传递啊守能量的，我们将这个机制里的 氢离子泵入这个摩羯系里面的话，这个里面是摩羯系，看我们刚才说利用了电子传递的能量，把它把这个线粒体机制里的氢离子泵入到摩羯系里面，那我们利用能量的运输，它是什么运输？它是不是一个主动运输消耗能量？ 好吧？所以我们电子传递就干了这个事情，好，我们接下来他继续传递，对吧？传递，那我们就开始正式的反应了，我们的刚才说这个粒子他和这个气可以进行反应，我们生成什么？是不是水？ ok， 那 我们这个传递最终结果是不是导致摩羯系的氢离子浓度要高于线粒体机制的的浓度？之后我们怎么样？他是不是想要顺浓度梯度的回来？那我们在运输那里学过，我们顺浓度梯度的回来，他是不是不消耗能量啊？他这里就提供了一个通道，那这个东西叫做什么？ 叫做 atp 的 核酶，你的地方可以从这个地方往里走，此时我们氢离子从高浓度的摩羯系顺浓度梯度的进入到了线粒体机制，对吧？过程他走过来，他是不是有一个势能？那势能他是不是可以提供能量？ ok， 那 这里他提供能量给谁？给 adp 和什么磷分分子，那最后生成什么？是不是 atp 啊？所以这个就是我们的电子传递链，以及什么氧化磷酸化部分，你可以去做题，去进行练习，然后他和我们什么光反应的电子传递链去进行对比，去进行比较的做题。好，这有氧呼吸我们看完了，我们看一下有氧呼吸， 有氧呼吸的区别在哪里？他是不是没有办法说彻底的去将它分解，那我们就是会生成一些不彻底的氧化产物。 ok， 那 我们第一步说无氧呼吸第一阶段是完全一样的， 也是在细胞质机制里进行。那第二阶段就开始有不同了，我们第一阶段产生的丙酮酸，接着开始写，那我们是不是同样的二倍的丙酮酸？我们第一阶段是不是产生了四个还原氢啊？四个还原氢开始进行反应，那我们生成的是什么？ 我们第一种情况生成的是酒精和二氧化碳，那我们你可以去进行配平一下，哪种情况它生成了酒精，那第二种情况它不彻底氧化的产物，第二个产物它也有可能是什么？ 乳酸。你刚才不小心写错了，我们第二阶段是没有 a p p 的 合成的，因为它没有氧气，它只能产生不彻底的一些氧化产物，那就是酒精或者说乳酸，对吧？比如说什么样的东西它无氧呼吸产生乳酸，什么样的东西它无氧呼吸产生酒精呢？绝大部分的植物 都产生酒精。那我们说等动物，比如说人类，我们的人体基细胞无氧呼吸啊，跑步跑多了，它是不是产生乳酸？ 是不很酸，他不可能产生酒精，对吧？酒精就中毒了。哈，就这个想法。嗯，还要记几个特殊的，那比如说我们植物以及什么酵母菌，也是什么产生酒精，对吧？我们在哪里详细学过？我后面有个实验啊，酵母菌的呼吸方式那里啊？效果很重要。那我们在发酵工程那里，传统发酵技术是不是也提到过，我们用酵母菌去做什么？ 做果酒，对吧？那就是它我想会产生酒精的这个特性。 ok， 那 下面同样的产生乳酸的记一下。乳酸菌，这传统发酵技术里面，我们制作泡菜是不是就用乳酸菌 啊？用的原理就是乳酸菌无氧呼吸啊，生乳酸。那同样的一些少数的植物器官啊，不说藜薯快浸、咸菜快根以及玉米胚什么的都是乳酸，这个剃一下就可以了。说无氧呼吸的场所在哪里？第一阶段啊，很显然就是在细胞质机制，因为它和氧呼吸第一阶段完全一致。那他第二阶段同样的在细胞质机制啊，所以说我们的无氧呼吸的全过程全部都在细胞质机制里， 无氧呼吸释放的能量大部分都以热能散失，那少部分储存在 agp 中啊，这样子的。所以说我们说无论是有氧呼吸还是无氧呼吸，他所能释放出来的能量他大部分都是以热能散失了，对吧？少部分在 agp 中啊，整个是一样的。那我们再记一下我们的总方程，大家无论是那些小方程以及总方程都要进行背诵啊，这非常重要的。 那再看一下我们这个有氧呼吸，他的这个过程是一定要背下来，我们主要的这个要点就是我们前后都有水，对吧？水一定不能约分，因为它代表了我们反应物的这个反应物是什么？它有水去进行反应，当然有水的产生啊，这要注意的，而且我们一定是有酶的作用，并且它是单向箭头的。嗯，大家一定要把这个系数背下来，比如说你看我们一分子的葡萄糖在有氧呼吸中是不是产生了六分子的二氧化碳， 那他在无氧呼吸中如果产生酒精这个路径的话，就产生只产生二分子的二氧化碳，那在这里是不是我们可以看到，嗯，酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸他产生二氧化碳的量是不一样的啊，就还有这个，就是列下来很多计算题中他可能会让你去计算这个比例啊，什么啊？也非常重要的。

那么接下来我给大家介绍包藏的一个大致的一个过程和步骤，其实大家可以关注这些关键步骤 信号当中涉及到的分子，其实就是我们要重点关注的，也是我们研究的一个切入点。其实包藏的复杂性就体现在它是一个动态变化 且受精细调控的过程，所以它是一个非常复杂的过程，涉及到非常多的精细的分子调控网络和不同的信号。这些信号不仅涉及到蛋白，还涉及到一些代谢产物等等， 还涉及到不同细胞之间的相互作用，并且它可以与多种细胞和功能相互交叉和作用。 那么具体来说，包藏的过程可以大致分为三个阶段，这三个阶段包括所谓的嗅觉阶段，第二个阶段是识别阶段，第三个就是消化和吞食阶段。 那么所谓的嗅觉呢？其实就是我们的第一步，因为我们刚才提到了包藏，它其实是吞，是凋亡细胞的一个过程。那其实第一步是什么呢？当细胞发生凋亡之后，它会释放各种信号分子， 我刚才给大家也提到这些信号分子不仅是像区化因子，比如说比较经典的 cx 三、 cl 一 这样的区化因子，还包括一些信号分子，比如说 atp， 比如说纸质 一些信号代谢的分子，这些代谢的或者是虚化因子的蛋白的信号，他会引导我们的巨石细胞向凋亡部位定向迁移，也就是说通过这些信，当然这里边 凋亡细胞释放这些信号之后，巨石细胞上面也有对应的受体和感知这些信号的蛋白和分子，所以这是一个相互作用的过程， 那这个相互作用的过程就是所谓的嗅觉阶段，释放这个信号之后，使巨噬细胞向凋亡部位迁移，在物理上、物理距离上使它们接近 这个相互的作用。这是第一个阶段所谓的嗅觉阶段。那么凋亡细胞其实它会释放很多可溶性的粒子，因为只有可溶性的粒子，它才会产生一个 远端的调节和远端的这个诱诱导，其中这个就是其实我们经常会见到所谓的这个方便密信号。 这些可溶性因子其实具有两重的作用，第一，作为区化信号来吸引吞食细胞迁移至凋亡细胞的附近，也就是我刚才给给大家介绍他一个物理层面物理距离上的一个捷径。 第二，它可以通过调节细胞的骨架，增强吞食受体表达，并促进消化装置的这个形成，从而使吞食细胞为后续这个包藏和吞食的过程 做出准备。同样这些信号还赋予浸润性以及组织助瘤性的这个吞食细胞抗凋亡、促再生以及抗癌的特性。 而不同于这个放的密信号的重要性取决于具体的生理环节。也就是说其实放的密信号虽然 是我刚才短短的几句话给大家做了介绍，但其实它是一个非常复杂的动态调控的过程，它取决于具体的微环境、生理环境、细胞类型以及凋亡所处的阶段。那不同放的密信号的这个多样化， 也是一种确保不同组织、不同环境中凋亡细胞均能被有效清除的一个机制。 那这就是第一步所谓的这个嗅觉阶段，那第二步就是既然发生这个， 呃，所谓的嗅觉信号，放射性信号，在物理上也使凋亡细胞和巨噬细胞接近了，那第二个阶段其实就是非常重要的一个阶段，叫识别， 也就是巨石细胞，它通过特异性识别，这里边有个非常重要的关键词叫特异性识别，这个后边我会介绍。识别貂王细胞主要其实是依赖于貂王细胞表面的 eatme 信号，也就是说吃我信号就是 非常形象的就凋亡细胞和巨噬细胞相互作用，之后，凋亡细胞会告诉巨噬细胞，哎，我是个凋亡细胞，来吃我吧。那么有吃我信号。 这个太极里边讲究阴阳相对，这里边就会有一个与之对应的别吃我信号。其实这就是一个非常好的，体内的一个非常常见的机制，有吃我信号，凋亡细胞诱导巨噬细胞去 这个吞吃貂王细胞，也会有别吃我信号，会有一个与之对应的平衡的对抗的一种信号，使他抗拒巨噬细胞去吞吃貂王，信这个信号。貂王细胞。那么值得注意的是什么呢？由于 吃我信号也好，别吃我信号也好，都需要貂王细胞与巨噬细胞的相互作用，这里边就涉及到关键的 配体和受体的结合。因为我们刚才提提到了第一阶段物理距离上貂王细胞和巨石细胞是相互作用的，那么在这一步当中，在识别阶段就会涉及到配体和受体的相互作用，以及桥梁分子的间接识别， 所以这一类关键分子多数是膜蛋白，包括存在于凋亡这个细胞上的膜蛋白和巨噬细胞上的这个膜蛋白，它们之间产生相互作用，包括一些辅助的桥联分子，这是这一阶段非常重要的一些关键分子。 那么最后一个阶段就是消化和吞食阶段，那么经典的吞食阶段和途径，它其实包括一方面早期吞食体逐渐成成熟为这个晚期的吞食体，最终与融媒体将融合，从而实现这个 呃内容物的，包括我们整个，因为细胞凋亡之后，他有很多内容物，那包括整个凋亡的细胞实现这个他的一个降解，也就是我们常见的所谓的融媒体的降解的途径。而另一个比较重要的途径其实涉及到 l c 三这样一个关键蛋白， 它相关的这个吞吃作用，这个也就是我们常说的 rap 的 这样一个吞吃作用。 那非常值得注意的是，在完成包藏过程后，巨石细胞它也会释放很多细胞因子、炎症因子，并经历相对应的代谢重编程， 也就是说其实在这个相互作用过程当中，凋亡细胞被巨石细胞吞食了，巨石细胞在吞食它的过程当中也会释放信号，发生一些非常重要的 这个变化和重编程，使得包藏过程不仅仅只是凋亡细胞与巨石细胞的相互作用，因为在这个过程当中释放的一些信号和因子还会与 微环境当中的其他细胞相互作用，当然这里边也包括其他的免疫细胞， 从而实现我们刚才说的包藏他的一个那些非常重要的在微环境当中的功能，包括组织稳态呀、炎症微环境啊、免疫耐受的调节呀等等，就是通过这样一个立体的、多细胞的、 复杂的相互作用来实现的，这也更加充分的说明了包藏它其实是一个精细且复杂的过程。那这些包藏关键的分子的发现，它功能的表型、调控的机制， 以及针对这些关键靶标的靶向治疗，在多种疾病当中其实目前都是没有被充分研究的，所以不论从机制层面还是治疗层面，他都具有非常强的可行性、 前沿性、原创性，这也是为什么他如此重要的一个原因。

今天我们做单克隆稳转细胞系，前两期我们已经把稳转细胞做出来，但是阳性细胞跟阴性细胞混在一起，即使阳性的表达也是高低不齐，这样的稳定性对实验结果会有很大影响，尤其是用于工程化表达的时候。所以要进一步做成单克隆细胞， 准备好完全培养机、十五厘米的十五毫升离心管等材料。此外，提前打开， 我们先吸走旧的培养基，再加入一毫升胰酶，把被慢病毒感染的细胞进行消化，消化过程中时不时轻轻摇晃，均匀分散胰酶。 later， 当看到细胞变为流沙状时，说明时间到了。 加入一毫升完全培养基，种植消化，轻轻吹打，让细胞分散，然后部分转移到十五毫升离心管中，标记离心管，离心离心参数一般为八百转，每分钟离心五分钟 离心结束。倒掉管子里的旧溶液，然后用少量完全培养基重拳细胞转移适量的细胞到十五厘米，对准 放入培养箱继续培养。等单克隆细胞长出来， 在灭菌的离心管中加入五十微升一枚， 盖上盖子， 从培养箱中取出细胞， 放到显微镜下观察。单克隆已经长好了，你看这个表达不错，这个不行，这个也不行，这个单克隆很好。我们打开培养米，用一叶枪直接挑取细胞， 如果是悬浮细胞，也用同样的方法，先观察，然后看这个表达不错，就可以直接挑选细胞，然后把细胞转移到已经预先加了一枚的灭菌离心管里， 然后把细胞转移到二十四孔板扩增培养。请注意每一个孔都代表一株单克隆，所以枪头不能通用。 转移完成后，我们就可以得到超高表达的单克隆文转细胞株，就像这一株单克隆慢慢长大，最终变成单克隆文转细胞系。