cassie为什么删帐号

你可能天天在听，在用 rasic 薄荷 rasic， single cell， rasic， spatial rasic， 名字越来越高级，但是呢，在很多人心中其实只有一个很模糊的印象，这期呢，我们就来一口气把各种 rasic 的 底层逻辑以及适用问题全部讲清楚。 欢迎来到 kasy 的 生物实验室，在正式开始之前呢，我们先建立一个总的逻辑框架。其实 rasic 的 区别呢，不是在于测序的本身，而是在于你把谁的 r a 混在了一起，以及你有没有保留空间信息。 我们先来讲第一种，也是最普遍的一种胞杆菌。胞杆菌的中文名呢，叫做整体转入组测序，它指的是把一个样本里面所有细胞的 rna 呢混合在一起，然后进行一个统一的测序。所以不管这个样本呢是一个组织，一块肿瘤，或者是一瓶培养的细胞，在胞杆菌里面呢，它们都会被当成一个统 一的整体。所以呢，它测的呢，并不是某一个细胞，而是整个样本的平均基因表达水平。换句话说，你拿到的胞杆菌的数据呢，其实是告诉我们在这个样本中，某个基因的平均 表达量是多少。这就是为什么狂犬疾呢，特别适用于做条件的处理，比如说正常 versus 疾病的组织处理前， versus 处理后，药物的加与不加。它的优点呢，也是非常的明显，流程呢是非常的成熟，成本也相对较低， 统计学上呢比较稳定。所以呢，直到今天，它仍然是转入组研究里面最常见最可靠的技术。但是呢，它也绕不开一个局限，就是你永远不知道这个变化是由哪一类细胞具体引起来的，如果只有一小群细胞会被平均掉。所以呢，在这个问题的前提下， single cell rnaic 横空出世。 single cell rnaic 呢，是指把 rnaic 的 单位呢从样本升级成了单个细胞，它的核心思想呢，非常的简单，既然细胞之间并不一样，那我们呢，就开始一颗一颗的去测。 在实验上呢，这通常意味着我们先把组织分离成单细胞，然后呢，再给每个细胞打上一个独一无二的 barcode， 最后呢，再通过测序把每一条 rna 都追溯回成原本的细胞。于是呢，这个数据的本质就发生了巨大的变化，成千上万个细胞呢，每个细胞都有自己的表达谱，这 这个时候呢，我们就可以回答很多细节的问题，比如说哪些细胞类型的存在，哪一类细胞真正发生了变化，是不是只有一小群的关键细胞在驱动整体的模型。所以呢， single cell r n c 擅长解决呢，并不是说有没有具体的变化，而是在于谁发生了这个 变化，对应呢，它的代价也是非常的明显的，它的成本很高，数据呢，也会更加的稀疏，对分析和生物学解释的要求呢，也会普遍更高。 还有一个先天的缺陷，这些细胞呢，在实验一开始就被打散了，所以呢，我们所有的空间信息也同时丢失了。这个时候呢，我们就要请出我们的第三代元老 spatial rnaic。 spatial rnaic 呢，中文叫做空间转路组，它在测 rna 表达的同时呢，也保留了它在组织中的空间位置。如果你的问题是些表达变化发生在组织的具体的什么位置，或者说它跟周围的细胞组织结构有什么样的关系？这些问题呢， single rnaic 的 具体做法呢，就是把完整的组织结 切片上捕获 rna， 同时呢，运用空间的 barcode 区记录这条 rna 来自于哪里。于是呢，你最终拿到的数据呢，并不是一个表达的矩阵，而是一张能够对应回组织结构的转录组的地图。这样呢，我们就能回答很多具体的问题，比如说在肿瘤微环境中，不同 区域的基因表达有什么差异，或者说在发育过程中基因表达的空间梯度。再比如说，在大脑器官中，不同功能区域的分子特征有哪些？当然，它也有很多 自己的限制，它的分辨率呢，通常是基于真正的单细胞测序，成本也更高，分析起来呢，也是比较复杂。一句话总结，包括， arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arc arcs arc。

很多人看到第三季的 cassie howard 当擦边博主变现很失望，觉得他变得非常廉价，跟第一季的柔软善良但义气共情。第二季的纤细但坚韧，有着画画梦想的 cassie 仿佛没有了什么关联。 但我想说，按照导演设定的开塞的性格发展，变成现在是必然的。如果你从第一季的开塞看他的成长路径，可以看出他一直是一个焦虑型、依附的性格。这种性格的成因可能是因为他童年伴随着父亲的抛弃，母亲的堕落，这让他产生了被遗弃的恐惧。而 天赋的无辜外貌和极致的身材比例，又让他将被异性渴望等同于安全感。 他的自我价值完全取决于别人的评价，他就像一面镜子，别人喜欢什么，他就褶皱什么。换句话说，他在用讨好交换爱。第二季他开始变得极端，面对内他陷入疯狂，不惜跟最好闺蜜麦迪翻脸。 他自我价值的挖掘已经悬在一线，他强迫性凌晨四点起床美容，就为对方看自己一眼，他已经从依赖转向了毁灭式的投入。这就不难解释第三季他为什么走向自我课题化， 把自己当做被观看、被评价的对象，而不是一个有主体意识的人。从剧情逻辑和心理防御机制来解释，开塞转向成人平台创作者不是为了表面上的为金钱和崇拜感，而是一种心理上对自己的保护。 心理学有一个很重要的概念，叫做创伤重复。既人不会自动选择更好的关系，而是会选择更熟悉的关系，哪怕是痛苦的关系。他从一开始就习惯了被忽视、被比较、被抛弃， 他把被爱误当成被需要。在经历了两季情感崩溃后，他决定与其被动的被男人当王璐而心碎，不如主动将自己商品化。 当他把自己的外貌和身体当做经营工具后，他就不用投入感情。对在爱里受伤极深的 casey 来说，成人平台对他是一种极度扭曲的心理避难所。 但这样就对吗？反观对面的麦迪，虽然他也有自己的性格缺点，但他有一样开些没有的东西，就是自我主体性。麦迪有极强的自恋保护机制，即使在内这种糟糕的关系，他也觉得自己是女王。他曾经说过， ninety percent of life is confidence the thing about confidence is no one knows if it's real or not。 他 明白美貌只是杠杆，心态才是核心。他理解感情里情绪的提供者，才是游戏赢家。 他可以控制内特的情绪，而 cathy 则总被内特情绪左右。他和 cathy 的 区别，一句话总结，一个在求确认，一个在做选择。我是寇拉，人性博弈爱好者，人间烟火。

我们互删吧，以后别联系了，你接电话呗。我我我跟你说。好吧，你个骗子啊。

在亢奋第三季里，所有的人都越来越崩了。 cassie 沉迷爱情， nate 沉迷体面，小如沉迷危险，而只有女王 maddie 越来越招人喜欢，很多人以前喜欢她，只是因为她漂亮性感，有 女王气场。但第三季之后，大家才发现，麦迪真正厉害的地方从来不是美，而是他比所有人更加清醒，他是整个亢奋宇宙里，少数真正理解这个世界运行规则的人。这一季里，几乎所有人都在失控，小茹沉迷于自己能掌控黑帮与警方的幻觉， kathy 沉迷 于流量婚礼和男人， nate 沉迷于我还能维持体面的谎言， jess 沉迷于我可以玩弄那些有钱男人的幻想。只有麦迪从头到尾都知道自己在干什么。 great！ 他 出身底层，没有学历，没有背景，没有资源，但他很早就意识到，在这个世界里，情绪不值钱，资源才值钱，幻想不值钱，规则才值钱。所以他从不沉迷爱情，也不沉迷梦 想。他只研究一件事，怎么活下去，怎么往上爬。你会发现，他是全剧里最懂包装这件事的人。他知道互联网喜欢什么，男人喜欢什么资本，喜欢什么流量喜欢什么。 他甚至能精准判断一个女孩应该怎么拍照片，怎么经营人设，怎么制造欲望怎么变现。 cassie 只会露肉。 it just feels a little desperate it feels like you're trying way too hard， instead of just being。 maddy 却知道，性感本身也是一种需要被设计的商品。这就是两个人最大的区别。 cassie 永远活在情绪里，而 maddy 活在逻辑里。 cassie 一 辈子都在渴望被爱，他看似在搞事业，实际上还是为了内，本质上都只是希望别人能告诉他你值得被爱。 所以他特别容易被操控，谁给他一点情绪价值，他就能把自己整个搭进去，这是为什么？ cassie 看起来好像一直在主动选择，但实际上他的人生几乎一直在被别人牵着走。而麦蒂最大的不同就是，他从来不会把被爱当 成人生目标，他知道爱情会变，关系会变，人也会变，只有能力和资源才是真正属于自己的东西。 而且 maddy 还有一个特别可怕的能力，学习能力。他不是那种会反复在同一个坑里摔倒的人。第一次和凯瑟琳合作时，他其实吃过很大的亏。当时他辛辛苦苦把凯瑟琳从一 一个普通女孩包装成网红，可最后真正赚到大钱的，却只有凯瑟琳自己。很多人遇到这种事，只会抱怨世界不公平。但麦迪不一样，他第一时间意识到，成年人世界里，感情没有意义，口头承诺也没有意义，真正有用的只有利益绑定和合同。所以后来当他再和凯瑟琳合作时，你会发现，他几乎已经完 完成了进化。当 casey 试图跳槽背刺他的时候，他只是非常冷静的拿出了早就准备好的经济合同。因为他已经学会了人与人之间一旦涉及利益，就必须用规则保护自己。亢奋里很多角色都活得像情绪动物，他们崩溃、恋爱、发疯、吵架，然后再重复 犯错。但麦迪不一样，他会记住每一次吃亏。第一次被坑，他学会了合同，第一次被背叛，他学会了利益绑定。所以你会发现，麦迪虽然年纪不大，但他看人的眼神已经有一种很强的成年 粘人感。 i forgive you。 而最难得的是，他虽然清醒，却没有变成一个彻底冷血的人。这一点，其实才是他最招人喜欢的地方。比如婚礼那场 戏，一个是他曾经深爱过的前男友，一个是曾经最好的姐妹。换成很多人，可能早就在现场发疯了，甚至故意砸场子。可麦迪没有，他明明很难受，明明心里还有情绪，但他依旧保持体。 他没有让自己变成一个歇斯底里的失败者，也没有让自己的情绪毁掉自己最后的尊严。因为他知道，失控除了让自己更难看，没有任何意义。 他甚至还能穿着高跟鞋，优雅的走完整场婚礼。这就是麦蒂最成熟的地方。他不是没有情绪，而是他知道什么时候该感性，什么时候必须理性。而亢奋里的其他人恰恰相反， ne 特永远想维持控制，所以他越来越扭曲。 maddie 小 茹总觉得自己能在危险中找到平衡，所以最终越陷越深。只有 maddie 从不幻想这个世界会对自己温柔，所以他反而活得最稳定。还有一个特别容易被忽略的细节，就是他对 joseph 的 态度， i don't expect to see you here。 他 知道 joseph 在 做 sugar baby， 也知道这种关系里藏着多少危险、交易和失控，但他从来没有高高在上地嘲笑过 joseph。 don't worry you can be my plus one。 因为麦蒂很清楚，有时候人不是因为想堕落才走到那一步的，很多时候，人只是没有别的路，这也是他和很多伪清醒的人最大的区别，因为他自己也是从泥里爬出来的人， 所以他不会轻易看不起任何人。他真正厉害的地方从来不是女王气场，而是他身上那种非常稀缺的东西。清醒但不冷漠，现实但不虚伪，懂规则但不彻底沉浮于规则。可以说，第三季的麦迪已经不像一个青春剧角色了，他开始像一个真正的大人。 而第五集最后，麦迪和阿拉莫之间的合作其实也已经透露出一种很危险的味道。阿拉莫并不是什么真正意义上的成 公人士，他更像是那种游走在灰色地带的人。这种人最大的特点就是他们总能让你觉得自己好像找到了一条比别人更 快的路，可亢奋最喜欢做的一件事就是毁掉这种比别人更快的幻觉。小茹当初也是这么想的， nate 和 cassie 以及 jose 都是，他们一开始 都觉得自己能掌控局面，但最后没有人真的赢过这个世界。而麦蒂现在可能也正在走向属于他自己的危险边缘。 cream of the crap。

你可能听说过 l c m s j c m s ms m s， 那 它们到底在测什么？和蛋白代谢物又有什么样的关系呢？ 欢迎来到 kathy 的 生物实验室。今天呢，我们就一口气讲清楚质谱 mass spectrometer 家族的原理，应用以及选择工。 首先呢，我们要搞清楚一个核心的概念，什么是质谱？简单来说呢，质谱是一种称分子质量加识别身份的技术，它的基本流程呢，可以拆分为三步，一步呢就是我们需要把分子变成带电的离子，这一步呢又叫做电离 analysis。 然后第二步呢，我们让这些离子在仪 器中进行一个运动，根据 m z ratio 被区分开来。接着呢，我们会记录每种离子的信号强度，用来判断它们是什么以及有多少。在需要时呢，我们还可以让离子进一步的进行 碎片，就叫 fragmentation。 这一步呢，我们可以通过碎片信息来推断分子的结构。当大家看到各种 m s 名字的时候，它们会经常分为几个部分，它的每个部分呢，其实都有自己的含义。一套质谱系统呢，通常会有三个部分组成， 一部分呢就是它的分离方式，比如说 j c l c， 它的这个前缀就是它代表不同的分离方式。下部分呢，就是电离方式，比较常见的呢，包括 e s i， e i 还有 modi。 接着呢，就是质量分析的方式，比如说 ms 或者 msms。 那 我们在生物学中常见的质谱技术有哪些呢？拿我们最基础的原理举例， l c m s， 又叫液相色谱，串联质谱。 l c 呢代表的是 liquid chromography， 代表着我们需要先通过液相色谱分离复杂的样品，比如说血浆组织提取物中不同的分子。 接着呢，就进入 m s， 就是 质谱仪的部分，我们通常会用 e， s i 等软电离的方式将分子呢转化为带电的离子。接着呢，再由质谱 去分析它的 m z ratio。 在 这个基础版本上，我们再进阶一版呢，我们就得到了 l c m s m s 串联质谱，这也是我们生物实验室中最常见的质谱方法。它的功能呢，不仅可以去识别分子，还能进行结构解剖，以及更高灵敏度 的定量。其实 m s m s 这个意思呢，是指多个质量分析步骤的串联。一级 m s 呢，我们会确定母离子，二级 m s 呢是碎解加上分析子离子，这样呢，你就可以更精确的检测复杂背景下某个特定的靶分子， 甚至可以定量。比较典型的应用呢，包括靶向代谢组、毒素药物的分析，以及通过碎片谱去定位碳酸化的位点。还有一个比较常见的呢，是 j c m s， 又叫气象色谱之， 它呢，其实跟我们之前说的 l c m s 比较相似，但是呢，它会更适合去测挥发性的分子，比如说有机溶质，香外物质等。它的原理呢，就是我们先进行气化，然后进行气象色谱分离。最后呢，就再去进行一个 m s 的 分析。它的应用呢，包括环境的分析，比如说农药残留污染，香料代谢组中的挥发物，以及法医毒物的检测。它的缺点呢，就是这个样品必须能够做气化或者前处理的延伸，所以呢，不太适合像肽段蛋白等太大的分子。 还有一个比较常见的质谱分析方法呢，叫做 modi tof ms， 它的中文名呢叫做机制辅助激光解析飞行时间质谱， 你看它名字非常长，但它的原理其实还是比较容易理解的，其中的这个 modi 代表的就是它的定义方式。 tof 呢， time of flight 就 代表了它的飞行时间，它的原理呢，是用激光去烘焙样品，然后呢去分析飞行时间来做质量的推断。它的应用包括蛋白指纹图谱， 比如说菌类的鉴定，蛋白修饰分析，质朴成像等。它的优势呢，就是去适合做高通量，而且不需要叶向分离。评论区告诉我，你还想了解哪些生物技术呢？欢迎点赞收藏这个系列，我会带你系统性的探索生物实验中各种有趣的技术。下期呢，我们就来讲一讲各种常见的生物成像技术，以及它能帮我们解决什么样的问题呢？