细胞传代步骤+注意事项🔥长视频预警‼️ 细胞传代怎么操作呢❓️传代时如何避免污染❓️今天我们一起来看一下细胞传代的过程及注意事项吧~ ✅实验准备 00:05 观察细胞状态是否能够传代 打开紫外灯照射30min以上 打开水浴锅37℃温浴试剂(Cytiva培养基、血清、胰酶、PBS) 🔥所有进入工作台的试剂和物品必须用酒精消毒后才可放入‼️ ✅培养基配置 01:56 10%血清+培养基(+必要时添加1%双抗) 即5ml血清+45ml培养基(+必要时添加500ul双抗) 🔥我们实验室常用的培养基是Hyclone的DMEM高糖培养基(适用于大多数细胞的基础培养基)和RPMI培养基(比较适用于悬浮细胞),一般建议试剂分装使用减少污染❌ ✅细胞消化 03:05 弃去培养基后,加入PBS清洗细胞1-3次 弃去PBS,加入胰酶后放置37℃培养箱孵育 消化结束后加入等量/一半的培养基终止消化 🔥第一次养细胞时建议每30s观察一次消化状态,巨噬细胞等不能消化的细胞可以直接刮刀刮下来,悬浮细胞跳过消化步骤 ✅细胞传代 07:05 将消化好的细胞转移至离心管中1000rpm离心3min 弃去上清后,加入适量培养基吹打重悬细胞 分别加入新的培养瓶中,混匀,37℃培养 🔥吹打混匀时需要小心轻柔吹打,防止剪切力过大伤害细胞。放置培养箱后需确保液面水平‼️ #细胞培养 #细胞实验 #Cytiva科研好物时刻 #细胞传代 #实验室日常
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