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为什么基因有显性和隐性之分?基因的显性和隐性之分本质上源于控制同一性状的不同等位基因在产生特定蛋白质(或其他功能分子)上的功能差异,以及生物体对这些蛋白质剂量的敏感度。 以下是更详细的解释: 基因与蛋白质的关系: 基因是DNA序列片段,包含制造特定蛋白质的指令。 大多数性状(如豌豆的圆滑/皱缩、人的头发颜色、某些酶的活性等)都是由一种或多种蛋白质的功能决定的。 等位基因的差异: 生物体的每对常染色体上,同一个基因有两个拷贝(等位基因),一个来自父亲,一个来自母亲。 这两个等位基因的DNA序列可能完全相同(纯合子),也可能存在细微差异(杂合子)。这种差异(突变)可能导致它们指令合成的蛋白质有所不同。 关键原因:功能蛋白的“剂量” 显性等位基因: 通常是一个能产生功能性蛋白质的等位基因。关键在于,在很多情况下,一个功能性基因拷贝(50%的正常蛋白量)就足以让细胞的特定生化途径正常工作,从而产生出该基因对应的“正常”或“优势”表型(性状)。 隐性等位基因: 通常是一个由于DNA序列变化(突变)而丧失了部分或全部功能的等位基因。它可能无法产生任何蛋白质,或者产生的蛋白质是功能不全的(比如酶活性很低、结构蛋白不稳定等)。 当只有一个隐性等位基因存在时(杂合子),另一个来自父本或母本的显性等位基因仍然可以产生足够量的功能蛋白,维持细胞生化途径的正常运作。因此个体不会表现出隐性性状,而表现出显性性状。 只有当成对的染色体上两个等位基因都是隐性的(纯合隐性)时,细胞才完全缺失有功能的那类蛋白(或者功能蛋白量低到临界值以下),此时隐性性状(通常是非正常的、缺陷的)才会表达出来。 举例说明:豌豆的圆滑与皱缩(孟德尔经典实验) 控制淀粉合成: 圆滑和皱缩的性状差异主要由种子中淀粉合成途径中的一个关键酶决定。 显性等位基因(R): 编码一个功能正常的酶,能有效地将糖类合成淀粉。 隐性等位基因(r): 发生了突变,不能编码功能酶或酶活性极低。 表型表达: RR(纯合显性): 有两个正常基因拷贝,产生足量功能酶,淀粉合成正常,种子饱满圆滑。 Rr(杂合): 有一个正常基因(R)和一个缺陷基因(r)。一个正常基因拷贝(R)产生的酶量通常就足以使淀粉合成途径正常运作到产生圆滑种子的程度。所以种子仍然是圆滑的。R(显性)掩盖了 r(隐性)的存在。 rr(纯合隐
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条带这样看!DNA pull-down实验结果解读来啦~ 在科研实验中,DNA pull - down 技术是研究 DNA 与蛋白质相互作用的重要手段。但 做完实验,怎么看结果可是关键! 今天就带大家深入了解一下 DNA pull - down 实验结果的解读方法~ 实验前的检测 在正式实验前,我们可以先通过 WB(蛋白质免疫印迹)检测预期的猎物蛋白的本底表达量。 这一步就像给猎物蛋白 “摸摸底”,要是表达水平太低,pull - down 后可能检测不到,就容易误判成假阴性结果。所以如果发现表达量低,建议在样本中过表达后再尝试,同时还能借此判断样本中蛋白是否已经发生降解。 要是没有 WB 条件或需求,也别慌,通过考染也能判断蛋白提取质量,考染的结果能让我们对蛋白的情况心里有数。 DNA 探针扩增结果 扩增好的 DNA 探针需要通过凝胶电泳来判断扩增是否完全。 这里要注意哦,未标记的 DNA 探针作为对照组,生物素标记的 DNA 作为实验组。凝胶电泳的结果就像一张 “成绩报告单”,能直观地告诉我们 DNA 探针扩增得怎么样。 实验后的检测 pull - down 后,我们再次通过 WB 检测猎物蛋白。 如果实验组能检测到猎物蛋白目的条带,而对照组没有,这就好比在 “大海捞针” 中成功捞到了我们想要的 “针”,说明该蛋白能与诱饵 DNA 特异性结合。 但要是都没有检测到,那就说明该蛋白不能与诱饵 DNA 结合。 另外,银染通常作为质谱送样上机前的质控,能检测 pull - down 后蛋白液的质量。在知道预期蛋白大小的前提下,还能切胶送质谱进一步分析。 在我们的视频里,会对这些结果解读的要点进行更详细的讲解,结合实际案例和图示,让复杂的知识变得超容易理解。 不管你是科研小白还是专业人士,都能从中学到新知识。 快打开视频,一起探索 DNA pull - down 实验结果的奥秘吧!
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高中生物选三第16题 16DNA疫苗是通过将编码某种蛋白质抗原的基因重组到表达载体后,直接或经包装后导入宿主体内并表达外源蛋白,从而激活机体产生免疫应答的疫苗。科研人员将新冠病毒的S基因(控制S蛋白的合成)改造后与质粒重组,构建出了新冠DNA疫苗。回答下列问题: (1)目的基因的密码子优化:不同的细胞在编码同一种氨基酸时,选择的密码子是不同的(也就是密码子使用频率不同),在宿主细胞里,使用频率高的密码子,其对应的tRNA数量多。据此推测,目的基因的密码子优化是指通过改造目的基因的碱基序列,使____,进而提高宿主细胞中目标蛋白的表达量。 (2)为构建重组载体,需先设计引物,通过PCR特异性扩增和改造S基因。用于扩增S基因的引物需满足的条件是______,为使PCR产物能被限制酶切割,需在引物上添加相应的限制酶识别序列,该限制酶识别序列应添加在引物的__________(填“3'端”或“5'端”)。为使S基因转录形成mRNA上的存在kozak序列(起始密码邻近的特定序列),需在S基因编码链的__________(填“3'端”或“5'端”)添加相应的序列。 (3)为便于纯化S蛋白,需将His基因(控制His蛋白合成)与S基因相连,构建出能表达S-His融合蛋白的重组质粒(如图甲)。构建重组质粒后,为了确定S基因连接到质粒中且插入方向正确,需进行PCR检测,若仅用一对引物,应选择图甲中的引物________________。已知S基因转录的模板链位于b链,由此可知引物F1与图甲中S基因的__________(填“a链”或“b链”)相应部分的序列相同。 (4)质粒转化:转化前需对大肠杆菌用CaCl₂处理,其目的是________________。吸取转化后的菌液,用涂布器将菌液在含氨苄青霉素的___________中均匀涂布,放置于37℃恒温箱中进行培养。 (5)表达情况检测:提取转化后的大肠杆菌内的蛋白质,用抗S蛋白抗体和抗His蛋白抗体分别检测相应蛋白是否表达及表达水平,结果如图乙所示。由此说明重组质粒在大肠杆菌内成功表达了__________。 (6)T细胞转染:提取大肠杆菌中重组质粒,将其与脂质体进行混合,室温静置一段时间后转染T细胞。此过程中,脂质体的作用是______ (7)上述重组DNA疫苗不会在人体中产生新冠病毒,原因是_
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