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高中生物选三第60题 60莫内林是从一种西非植物的浆果中分离提纯到的甜味蛋白,甜度是蔗糖的3000倍左右。下图 1所示利用大肠杆菌生产莫内林,其中M基因可表达合成莫内林。表1是为PCR扩增M基因设计的引物,画线部分是所需使用的限制性内切核酸酶的识别序列。 Ampr为氨苄青霉素抗性基因,氨苄青霉素可抑制细菌细胞壁的形成,对真核生物生长无影响 限制性内切核酸酶识别序列及切割位点: (1)若选用XhoI和Sau3AI对质粒A进行切割,为实现其与目的基因的连接,可在目的基因两端添加_____。引物1的结合位点可能在____(选填图1中的编号)。引物1的画线部分序列在A中______(有/没有),引物2画线部分的序列在B中_____(有/没有)的可能性较高。 (2)已知C中的培养基成分有水、酵母粉、蛋白胨和氯化钠,并按一定比例添加氨苄青霉素。将 C中有生长优势的菌落经多次______后作为菌种在发酵罐中培养,积累产物,发酵罐中培养基成分与C中培养基相较可不添加_____,并采用____的方法对装填在发酵罐中的培养基灭菌。 (3)通过大肠杆菌生产的莫内林甜度较天然莫内林大为降低,天然莫内林也易因温度等因素导致甜度降低甚至甜味消失,科学家分析其中的原因并进行了后续的工程学改造,请结合所学知识,分析两种莫内林甜度降低的原因分别是_____。 (4)针对上述问题,从分子水平对蛋白质进行改造是解决莫内林甜度降低的工程学思路。以甜味蛋白质的三维结构为基础,选择影响其与受体相互作用的关键氨基酸残基,进行定点突变,将获取的新基因与酵母质粒中构建_____,导入到真核细胞如甲醇营养型毕赤酵母中,并评价突变体的功能,筛选能产生_______等优良性能的甜味蛋白质的菌种。研究结果表明,相对于天然的野生型甜味蛋白质monellin,突变体E2N/E23A的甜味均提高了约3倍左右,而突变体E2N/E23A的热稳定性(Tm值)提高了约10℃。 (5)接上题,与大肠杆菌转化不同,毕赤酵母转化前一般先用低温山梨醇溶液处理,使其处于一种____的生理状态;同时需将外源DNA处理成线性,分析原因可能是_转化后的毕赤酵母进行发酵培养分为两个阶段:生长阶段,以甘油为碳源、获取大量的功能性细胞;诱导阶段,通过添加甲醇来诱导表达重组蛋白。培养基中除加入甘油、甲醇外,还需要提供的营养物质有_
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半辛半甜半心寒 半云半雾半似仙 半江半河伴古城 拟声拟态风满楼 这四句诗通过自然意象与人生感悟的交织,表达了一种虚实相生的意境和复杂的情感状态: 诗句解析 半辛半甜半心寒 人生滋味的复杂性:既有艰辛(辛)与甜蜜(甜)的交织,也暗含内心的寒凉与无奈,体现岁月沉淀后的苦涩与回甘。 类似 “七分酸楚三分甜” 的人生况味,苦乐参半中带着对生活的深刻体悟。 半云半雾半似仙 自然景象的朦胧美:云雾缭绕中若隐若现,营造出空灵、超凡的意境,暗含对仙境的向往或心境的超脱。 隐喻人生如梦幻泡影,似真似幻的状态。 半江半河伴古城 地理与历史的交融:江河环绕古城,既写实景,也象征时间与空间的交织,暗含沧桑与宁静。 古城象征厚重历史,水则代表流动与变化,动静相宜。 拟声拟态风满楼 动态与氛围的渲染:风满楼的呼啸声,既是自然现象,也暗喻动荡或变革的前奏。 源自 “山雨欲来风满楼”,比喻局势变化前的紧张感。 整体意境 四句诗以 “半” 字贯穿,形成虚实结合的画面: 自然层面:描绘云雾、江河、古城在风雨中的朦胧美。 人生层面:表达苦乐交织、超脱与留恋并存的心境。 哲学层面:体现 “半” 的智慧 —— 不圆满却完整,留白中蕴含无限可能。 若需创作或理解类似表达,可关注: 意象叠加:自然与人文元素融合(如云雾 + 古城)。 情感张力:对立情绪的平衡(如寒与甜、醒与醉)。 动态感:通过 “拟声拟态” 增强画面冲击力。
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