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WinnerLab1月前
科研实验室日常之wb民工的一天 #westernblot #科研实验室
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八一今天做实验了吗1年前
浙大学姐手把手教你做WB（下）巨巨巨详细版，包会的那种🛻#研究生 #WB #wb #电泳 #转膜
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李莫寒（科研服务）2周前
WB实操 WB实验步骤，看完你也会#WB实验步骤 #WB实验 #蛋白实验 #医学实验技术
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八一今天做实验了吗1年前
浙大学姐手把手教你做WB（上）巨巨巨详细版，包会的那种🛵#研究生 #WB #westernblot #实验 #实验教学
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下辈子不读书做只猪🐷3月前
#实验室日常 #研究生 #WB实验 #科研 #读博的日子 之前已经分享了电泳、转膜和细胞冻存，大家可以看前面的视频哦～ 今天是western实验的后续步骤：裁膜、敷一抗二抗、洗膜、发光、显影 视频内容： 0：00～2：20 裁膜方法 2：20～4：30 pvdf膜的使用 4：30～4：50 转膜条件终极公式 5：15～7：40 一抗孵育和注意事项 7：40～8：40 洗膜，发光注意事项 发转膜视频的时候有粉丝问我推荐pvdf膜，我现在用的是cobetter家的（科百特），对标默克，我的使用感受是和默克的pvdf膜效果没差的，并且拍视频又做了个测验，展示了默克和科百特的使用结果～（视频中已经展示啦） 默克的pvdf膜相对来说比较贵，我们组之前也用的这个，后来组里人太多用不起了，cobetter的会更友好一些，但是做出来的结果都差不多，完全可以替代～而且基本不影响蛋白strip的效果 cobetter的pvdf膜有不同规格的➡️卷/片，卷式的需要自己裁，片式的不需要自己裁，可以直接用，更方便，根据自己需要选择就可以！ 个人比较喜欢片式的，膜不弯曲，转膜和发光的时候，使用手感更好，也更不易翻车❗️ 他们家现在还有试用装，感兴趣的宝可以使用感受一下😜@科百特
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洁美生物~谢楠2年前
Western Blot _ WB实验中封闭、一抗二抗孵育和曝光显影过程和细节分解 #医学科研
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康旭禾生物3月前
都可以看懂的WB全流程 #wb实验 #wb #科研 #科研服务 #实验外包
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科研小助手1年前
WB实验流程|完整小白教程，WB指南心得！|||Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。 #实验室日常 #实验室 #实验 #wb
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下辈子不读书做只猪🐷7月前
随手记录了一下自己日常裁膜敷一抗的过程。 随便看看吧🥸 个人习惯是一个剪刀搞定所有，我裁的也很整齐，手也比较稳。 新手宝宝可以别学我…选择尺子➕小刀划拉就行，不过我从最开始接触wb的时候就是直接剪。🌝😂 注意手和其他脏东西不要接触到膜的正面就行，也就是有蛋白附着的那面～ 上期发过电泳上样的视频，可以去翻翻看。🥸 #实验室日常 #科研 #科研狗的日常 #研究生 #westernblot
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威斯腾生物4月前
最简单的操作出最多的纰漏之WB孵抗体 #科研日常 #WB实验 #研究生学习 #实验室日常 #生物实验
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下辈子不读书做只猪🐷1周前
东方女人战胜wb的第1800天，笑死 本期视频内容： 0～1：00 一抗的选择 1：00～2：18 有超声仪的收蛋白方法 2：18～3：10 无超声仪的收蛋白方法 3：10～3：51 电泳上样 3：51～5：00 转膜 5：00～5：56 封闭，敷一抗，洗膜，发光 Abmart家的一抗还没领试用的可以申请试用，很多指标都有，我用过好多种了@Abmart #研究生日常 #实验室日常 #科研狗的日常 #科研 #读博的日子
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赛维尔生物_Servicebio3年前
一分钟了解免疫印迹WB实验#实验
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下辈子不读书做只猪🐷2周前
做了无数次免疫荧光，成功率一直很高😇。之前发过文字版本的protocol，以及很多小tips，这次分享一下视频从头到尾的操作叭～ 免疫荧光可以用目的一抗染内源蛋白，也可以转染核酸进入细胞染外源蛋白，根据自己的需求选择用什么方法～ 例如标记线粒体，就需要染内源TOM20或者VDAC等… 如果内源蛋白表达很低很低，则可以外转进去然后标记 免疫荧光比western信号会低很多，一抗二抗使用浓度也会更高（1：200～1：500） 如果做外转标记蛋白，必须要保证转染效率！ 提高转染效率的方法： 1、采用适宜的密度：70% 2、转染试剂的选择：lipo2000或lipo3000 3、若是难转染的贴壁细胞，或者悬浮细胞，神经细胞等…建议做稳株后再做免疫荧光，效果会好很多 4、转染前预处理： 采用转染前专用培养基预处理，主包一直在用的是XR西瑞家的，很好用❗️@XR西瑞无限 细胞40%密度时，把培养基弃掉，换成XR转染前专用培养基，培养12～24h，我一般就是培养过夜，这时密度大概70%，刚好做转染。 这个培养基可以增强细胞对核酸的摄入，提高转染效率，做免疫荧光很适合使用了～日常做转染也可以用 细胞状态不会受影响 做免疫荧光不建议采用三无培养基饥饿处理，虽然这种方法也会一定程度上提高转染效率，但是会影响细胞状态，状态差的细胞做出来的结果很可能不尽人意 ps：贴壁细胞转染后24小时，消化细胞重铺于爬片上，消化时一定要注意不要消化过度！此时细胞携带核酸，比WT细胞脆弱一些，XR的消化酶很温和，基本不影响细胞，而且消化很快，大概1min就能消化下来，推荐！ #实验室日常 #科研 #科研狗的日常 #研究生 #读博的日子
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优品生物6天前
不是吧？WB洗膜还要分3种方法？！ #WB #导师 #科研狗的日常 #实验室日常 #研究生
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斯达特生物4月前
Western Blot 实验操作教程-拆膜、封闭、一抗孵育 《Western Blot 实验操作教程》第3期来啦，本期视频为大家演示WB实验操作第五步拆膜（拆膜、染色、清洗、晾干），第六步封闭，第七步一抗孵育，后续实验步骤见下期视频。#斯达特生物 #国产抗体 #抗体 #WB实验
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恒意赛生物4月前
生物研0必学的Western Blot实验步骤详解（下） #WB实验 #实验室日常 #恒意赛 #科研
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速聚生物1年前
一抗的选择要点是什么？ #图文 #wb #一抗 #科研 #实验
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北京多研生物1周前
WB显影总翻车？这些坑我替你踩遍了！ 5年WB实验代做经验，2000+样本实操总结，这份显影干货直接收藏用，新手老手都适配！ 🔍 显影前3大关键 1. 抗体孵育：一抗4℃孵育12-16h，超24h易致背景过深；二抗室温1h，孵育后TBST洗3次（每次5min），洗净残留是关键。 2. 膜的选择：＞20kDa蛋白用PVDF膜（需甲醇激活30s），＜20kDa选硝酸纤维素膜，确保蛋白结合率。 3. 封闭液匹配：普通蛋白用5%脱脂牛奶，磷酸化蛋白/组蛋白必用BSA，避免牛奶中磷酸酶破坏位点。 ✨ 显影操作技巧 ① 显影液1:1现配，30min内用完，避免活性下降； ② 膜完全浸湿后室温静置1-5min，见清晰条带立即用去离子水终止，防止过曝； ③ 高表达蛋白曝光30s-1min，低表达5-10min，多次曝光优于单次长时间曝光。 膜需重孵育时，stripping buffer洗脱后务必洗净，避免残留信号干扰。 WB显影细节定成败，想高效获可靠结果？专业团队全程把控实验。 样本处理到显影成像全流程保障，条带清晰、结果可信，帮你省时省力✨ #WB显影 #实验干货 #生物医药实验 #蛋白印迹 #实验代做
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博奥森生物3月前
博奥森|WB操作原理大揭秘 最近好多师弟、师妹追着问 Western blot 实验步骤及原理，发现大家对流程逻辑还不太清楚。 今天就带大家盘一盘「Western blot 操作原理」，知其然更要知其所以然！ #WB  #westernblot #博奥森  #抗体   #科研
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赛文创新【Sevenbio】7月前
WB实验从零开始-第七期抗体孵育 上一期转膜完成，这期开始洗膜➡封闭➡洗膜➡抗体孵育 #实验室日常 #赛文创新 #wb实验 #抗体孵育
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优宁维不会逃科研人3月前
WB实验抗体孵育小技巧#WB实验 #westernblot
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守正弘药动物实验4月前
你的WB条带总"隐身"？90%的人漏了这一步！ 条带模糊？背景脏？看完这个视频你也能跑出SCI级Western Blot！ #科研日常 #实验技巧 #分子实验 #WB #守正弘药
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优宁维不会逃科研人1周前
沉浸式做实验—westernblot显色#实验室日常 #wb实验 #科研狗的日常
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细胞之邦2年前
WB实验中，怎么进行膜的封闭？这6个使用封闭剂的注意事项需牢记！#WB#免疫沉淀#科研狗的日常 #你在抖音搜什么
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奔放的野牛5月前
985研究生失业在家发nature 的第一天，来简单做个wb #生物学 #985研究生 #985研究生失业 #wb #发疯
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科研前沿-kori4月前
大分子and小分子蛋白跑wb的综合优化方案🧫主包做170kd和10kd的蛋白，分享下经验叭～ （图中条带一抗来源均为Abmart） 1、样品制备： 🌟大分子： 用温和裂解液，例如ripa（中）、coip裂解液； 很多大分子是膜蛋白，可做温度梯度进行变性，选择合适温度 我做的大分子变性条件：70度，10分钟 🌟小分子： 可用强裂解液，例如SDS裂解液、ripa（强） 大部分变性条件：100度，5分钟 ➡️裂解液越温和溶解性越差，根据待测靶蛋白选合适的 ➡️保证10ul体系有20～30ug蛋白 2、凝胶体系（图2） 特别大的大分子可选择Tris-Acetate凝胶试剂盒，会比普通的效果好些，200kd左右的用普通配胶试剂即可 大分子：6-7.5%胶 小分子：12-15%胶 3、跑胶（图3图4） 🌟大分子： 把上面条带尽可能跑开，跑胶时间延长，低电压跑（100v），跑胶时间长可在冰水浴中进行，把下面的loading带跑出去，可选择略大分子内参：例如Hsp90，就能一起转膜 🌟小分子： 把下面的条带跑开即可停止，电泳时间缩短，电压可为130v，一般跑到胶的2/3处即可，不要跑到最下面，可选内参：GAPDH，actin等… 4、转膜（图5） 大分子：0.45um pvdf膜 (200kd以内也可用0.22um的，亲测没影响） 小分子：0.22um pvdf膜 转膜条件： 大分子200kd： 恒压90v 或 恒流300mA 2.5h 小分子10～20kd： 恒压90v或 恒流300mA 20～30min，如果有30～50kd的内参一起转，可转45min 采用冰水混合物，湿转法（尤其大分子），效果更好，个人感觉大分子转膜：采用传统转膜液比快转好很多，配方在图7，可用乙醇代替甲醇 比较需要注意的就是这几方面❗️ 从封闭到一二抗孵育没啥差别，一抗的选择也很重要～ Abmart家的一抗是本人一直在用的！好几个指标都用过，效果都挺理想的嘿嘿😈 例如…细胞自噬Parkin，凋亡Bax，bcl2 ，焦亡GSDMD，炎症小体nlrp3等…图6指标为Bax #科研日常#wb实验#WB实验 #研究生#研究生日常
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细胞之邦1周前
验证某个细胞上有无该蛋白的存在？ 要验证某个细胞上有无该蛋白的存在，需要做免疫组化和western blot实验吗？做这两个实验的一抗和二抗可以共用吗？#WB
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优品生物4月前
WB抗体稀释的终极冷门技巧！ #WB #科研 #实验室日常 #研究生 #导师
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皮肤科付国亮3月前
听说广东人油得都能炒菜了？还不赶紧跟着皮肤科医生学控油大法！ #控油 #健康科普有真知 #医学科普 #皮肤
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不知道。3月前
很好睡的沉浸式护肤又又又来啦～#沉浸式护肤 #助眠 #晚间护肤打卡
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糕糕不长痘6月前
3min超详细底妆教程跟练！内油外干、屏障受损如何上底妆不卡粉起皮！痘肌瑕疵皮get妈生好皮～#拯救手残党的美妆技巧 #创作者中心 #创作灵感 #娜妮思粉底霜 #底妆教程 @抖音小助手 @抖音创作小助手 @DOU+小助手
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伊能静4月前
57岁姐姐的“不老眼部”保养法 姐姐坚持了30年的独家“眼部按摩”手法，答应妹妹们的女明星眼周护理教程来咯～ *早上用温热的“绿茶茶包”敷眼睛，可以帮助我们眼周抗氧化，促进循环； *敷完茶包我们可以用冰袋或者冰勺滚动眼周，让眼周更紧致； *再来就是姐姐坚持了几十年的眼周按摩手法，搭配眼油，以油养眼： 眼下从外往内推、太阳穴10-15下、上眼皮提拉、眉弓骨打开、鼻梁骨推松、川字纹向上刮； *如果工作导致眼周疲劳，姐姐还会用润眼仪，小小一只携带很方便。 好啦，以上就是姐姐的“女明星眼部护理宝藏流程”，想跟姐姐一样看起来眼睛这么明亮有神，妹妹们现在就保养起来吧~ #护肤 #眼部护理 #女明星保养秘诀
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余小鱼🐠7月前
好运都藏在努力里 一起加油吧 #教师日常 #日常vlog #校园生活 #我的生活日记 #上课日常
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团团吃饱饱3月前
借点实验器材来模拟实验室拍面膜啦! #拍摄 #WIS #WIS水润面膜 #护肤
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李先生颜究所5月前
50岁林志玲冻龄秘诀曝光#保养 #女性保养 #抗老 #冻龄
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啊来3月前
做了三年美妆博主愣是舍不得换的一些爱用物！！！ 每个都是我的独家私藏！！ #分享爱用物 #好物分享 #美妆博主 #平价好物 #年度爱用
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襄阳潘院长|薇美一生4月前
嘘～带你体验沉浸式护肤的一天🥰✌️#襄阳 #护肤 #同城护肤 #皮肤管理 #问题肌肤修复
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杀死玫瑰3月前
我这么粗糙的手法都能做到的十分钟速成通勤妆教程～ #妆教 #化妆分享 #古早 #能抗住原相机质感妆容
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沐羊小只5月前
来啦来啦！！姐妹们点名要的恶女妆～好适配万圣节和酷酷的小裙子 #美妆模范生 #能抗住原相机质感妆容 #新手化妆教程 #恶女妆
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杨子壹Joy7月前
女生的钱就这么好骗？看我不狠狠打假！#测评 #打假 #美妆测评
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阿牙阿牙2周前
高颧骨菱形脸淡妆干货跟练‼️巨详细 这种看起来又贵又淡的妆，你感觉很简单，结果画脸上又纯又土🆘 今天就手把手每个步骤都给你讲清楚，像我一样颧骨外扩的菱形脸也能变成贵气感小美女✨ #菱形脸化妆#新手化妆#菱形脸颧骨高#有效化妆#清冷感妆容
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菲恩生物1年前
蛋白免疫印迹wb实验，一抗孵育操作步骤#蛋白免疫印迹#wb实验 #实验室日常
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眼部整形医生 张吉1周前
双眼皮手术后保姆级护理攻略#医学科普 #科普健康知识 #双眼皮术后 #护理攻略 #广州双眼皮
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启研智学3周前
🧪接上回，WB实验保姆级教程！ 小启，今天把WB实验剩下的教程做出来了！ 转膜（湿转法） - 切胶激活膜：先把浓缩胶和分离胶多余部分切掉，只留目标分子量区域；PVDF膜用甲醇泡1min，再用转印缓冲液平衡10min ✨ - 转膜三明治：按“负极→海绵垫→滤纸→凝胶→PVDF膜→滤纸→海绵垫→正极”顺序叠，千万别搞反方向 - 缓冲液配方：25mM Tris + 192mM甘氨酸 + 20%甲醇，pH值控制在8.3 ️封闭抗体孵育 封闭：普通蛋白用5%脱脂牛奶（溶于TBST），室温1小时或4℃过夜；测磷酸化蛋白记得换5% BSA（艾碧维），背景立马降下来 📉 一抗孵育：按抗体说明书用稀释液调浓度，4℃孵育过夜或室温90min，摇床慢摇更均匀 洗膜：TBST（含0.1%Tween-20）洗3次，每次5min，把多余抗体洗干净！ 二抗孵育：HRP标记二抗（比如艾碧维抗兔IgG-HRP AWA70822）按1:5000稀释，室温孵1小时，之后再用TBST洗3次，每次5min 3ECL检测显影 - 配工作液：A液（发光底物）和B液（增强剂）1:1混合，一定要避光操作哦 ☀️ - 显影步骤：膜的蛋白面朝上，均匀滴ECL液（0.1mL/cm²），反应10-15秒；用滤纸吸掉多余液体，放进化学发光成像仪检测 - 曝光时间：刚开始3-5秒，根据信号强度调整，最长不超过5min 跟着步骤做，WB实验成功率直接拉满～#实验 #科研 #生物实验 #wb #实验科普
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实验加油站3年前
WB实验操作演示一，视频包括WB实验步骤，所需试剂等。第一讲主要讲解抗体的选择以及蛋白质的抽提。#实验 #wb #科普 #科研
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八大处整形医生王克明6月前
打完水光针后做对这几步，才不会越打越丑！ #水光针 #医美 #变美 #抗衰老
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云克隆科技4月前
WB检测日记 Part（2） #实验室#实验室日常 #科研 #WB
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南京博研生物4周前
WB选封闭液懵了？5％脱脂奶这么用才对 #WB实验 #研究生日常 #科研日常 #生物实验 #医学生
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今夜我是廉颇3月前
一个冷知识即使涂了防晒太热也会变黑 开学要军训的 直接码住 下训保姆级护肤指南#军训#护肤 #学生党
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怡宝不是水啊（读研生存版）4月前
倾情制作胃肠外科周末值班大片 干完这24h怒睡一下午#分享日常生活 #规培 #外科研究生 #外科医生
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皮肤科主任刘怡灵1月前
秋天换季脸部过敏，泛红、瘙痒和发烫！教你在家快速缓解！#换季护肤 #脸痒 #皮肤过敏 #皮肤泛红 #健康科普
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SCI 科研助手6月前
WB二抗孵育时间缩到30分钟可以吗 #westernblot #sci实验 #科研 #实验发文 #一抗二抗
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瑞瑞啊6月前
🥰快来看wb的超详细实验过程 是不是还有宝子不知道wb实验该如何着手， 还在苦苦寻找实验操作方法，那你一定不能错过这个视频！😏 后面我打算持续的出一些wb的实验操作， 今天先给大家介绍具体的实验方法， 后期会给大家录制各凝胶的制作过程哦！ 如果需要就赶紧码住吧！🤩#小技巧 #科研 #WB实验 #实验 #生物
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优宁维不会逃科研人3月前
WB实验无条带？有没有可能是是一抗、二抗没用对？#WB实验 #westernblot #科研干货 #小优大学堂
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🔵杨能能1年前
#能能小知识#   No.1292 WB（Western Blot）蛋白免疫印迹实验操作步骤 1.跑胶 2.转膜 3.封闭 4.一抗孵育 5.洗掉一抗 6.二抗孵育 7.洗掉二抗 8.ECL发光 #每天学习一点点 #wb #蛋白免疫印迹#坚持长期做正确的事
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栖云堂温静1周前
#每日护肤 #护肤干货分享 #护肤干货 #一分钟干货教学 这是一个2分钟的世界 一分钟，通过颜值让别人认识你 另一分钟，让别人因为颜值而你喜欢你
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中科小怡1年前
WB实验回收一抗，小伙伴们快来看看吧#实验室日常 #科研 #医学领域 #WB #做实验
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南京博研生物3月前
WB膜有黑点怎么破？ #研究生 #wb #科研 #实验室日常 #研究生日常
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温暖小文4周前
我的一周流水账 #研究生日常 #流水账 #日常生活 #研究生生活
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好的 老师2年前
理论讲解＋实际操作，带你玩转Western Blot ，该章节为第一节 主要教学在wb中如何制制备蛋白样本，详细清楚拍摄整个过程，裂解细胞后通过BCA试剂盒测量浓度，最后制样，希望对你有帮助！点个关注 科研不迷路！#科研不迷路
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医瑞贝中科嘉迪实验小杰1年前
WB 实验回收一抗 #WB实验 #实验室日常 #医学生实验 #科研狗的日常
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