土壤过氧化氨酶活的测定 高锰酸钾滴定法 1)方法原理 以高锰酸钾滴定酶促反应前后的过氧化氢,以消耗的高锰酸钾的量来表征酶的活力。在 4℃条件下,1h内消耗1mL 0.02mol/L KMnO4,的酶量为一个酶活力单位,单位以U表示。 2)试剂 (1)甲苯(C7H8)。 (2)硫酸溶液(0.2mol/L):量取5.43 mL的浓硫酸(H2SO4,98%),缓缓加入约 200mL水中混匀,待冷却后用水定容至500mL,置于4“C冰箱储存。 (3)高锰酸钾溶液(0.02mol/L):称取1.58g高锰酸钾(KMnO4),用水溶解,缓缓煮沸15min,冷却,用水定容至500mL,避光保存,使用前标定。 (4)过氧化氢溶液(3%):量取50.0mL30%过氧化氢(H2O2)溶液,用水定容至 500mL,置于4℃冰箱储存。 3)操作步骤 (1)样品测定 称取风干土壤试样5g(精确至0.001g),放入100mL小口锥形瓶中,加入1.0mL甲苯,摇匀,置于4℃冰箱30min。取出后立刻加入25.0mL 冰箱储存的过氧化氢溶液,充分混匀后,再置于冰箱中1h。取出后立即加入25.0mL冰箱储存的硫酸溶液,摇匀后用定性滤纸过滤。取 1.0mL滤液于锥形瓶中,加入5.0mL水和5.0mL 硫酸溶液用高锰酸钾溶液滴定至淡粉红色终点。, 再次测定应做无土空白试验,即不加土壤试样,其他操作同样品测定。 4)结果计算 土壤过氧化氨酶活按下面公式计算: x=[(V2−V1)×D×c1]/m×c2×t 式中: X-土壤过氧化酶活力的数值,单位为酶活力单位每克(U/g); V1-土壤样品消耗高锰酸钾溶液体积的数值,单位为毫升(mL); V2-无土空白消耗高锰酸钾溶液体积的数值,单位为毫升(mL); D-分取倍数,容量瓶中反应液体积/吸取滤液体积; c1-高锰酸钾溶液标定浓度的数值,单位为摩尔每升(mol/L); m-土壤试样质量的数值,单位为克(g); C2-高锰酸钾溶液理论浓度,值为0.02molL; t-反应时间,单位为小时(h)。 测定结果用2次平行测定的算术平均值表示,所得结果应保留2位小数。
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实验室试剂管理:科学存放与安全取用的艺术 试剂存放:细节决定成败 实验室中的试剂种类繁多,性质各异,正确的存放方式是确保其稳定性和安全性的首要条件。这不仅仅是一个简单的“分类存放”问题,更是对化学原理深刻理解的体现。 1. 容器选择:量身定制 固体与液体,各得其所:固体试剂通常装在广口瓶中,便于取用;而液体试剂则偏好细口瓶,减少挥发。对于那些见光易分解的“娇贵”试剂,如硝酸银(AgNO₃)和浓硝酸(HNO₃),棕色瓶成了它们的避风港,置于阴暗低温处,远离光线的侵扰。 密封艺术:易挥发或易升华的试剂,如液溴和碘,需要更加严密的保护。液溴不仅装在棕色细口瓶中,还需加水覆盖表面,形成水封,防止其挥发;碘则被密封在棕色广口瓶中,避免升华造成的损失。 特殊材质,应对挑战:面对能腐蚀玻璃的氢氟酸,塑料瓶成了它的新家;而强碱溶液如氢氧化钠(NaOH)和氢氧化钾(KOH),则因能与玻璃中的二氧化硅反应,导致瓶塞粘连,转而采用橡皮塞,既安全又方便。至于那些能让橡皮腐蚀或溶胀的试剂,如液溴、浓硝酸和有机溶剂,玻璃塞成了它们的不二之选。 2. 环境控制:因物制宜 隔绝空气,守护纯真:钾、钙、钠等活泼金属,易与空气中的氧气和水蒸气反应,实验室中通常将它们保存在煤油中,形成一层保护膜;锂则因其密度小于煤油,被保存在石蜡中。白磷,这个易自燃的“火种”,被温柔地包裹在水中,远离氧气的诱惑。固体氢氧化钠易潮解,密封保存成了它的日常;过氧化钠(Na₂O₂)和电石等,则因易与空气中的水蒸气反应,同样需要密封的呵护。 防氧化与水解,智慧应对:硫酸亚铁(FeSO₄)溶液中的亚铁离子(Fe²⁺)易被氧化为铁离子(Fe³⁺),加入铁屑,利用原电池原理,有效防止氧化;氯化铁(FeCl₃)溶液因水解而浑浊,加入盐酸,抑制水解,保持溶液清澈。#实验室日常 ##检测 #检测公司 #检测报告
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