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金开瑞生物1年前
一气呵成！双链cDNA纯化实验，快速上手操作 今天来给大家科普下双链 cDNA 纯化实验。 什么是双链 cDNA？简单说就是以 mRNA为模板，经逆转录酶作用合成的互补 DNA 双链。 在这个实验里，我们要通过一系列专业手段，把双链 cDNA 从复杂的反应混合体系中分离、提纯出来。 那它有什么用途和意义呢？在分子生物学领域，双链 cDNA 纯化可是极为关键的一步。它为后续 基因克隆、 文库构建以及基因表达分析等研究筑牢根基。 纯净的双链 cDNA 样本，能极大减少实验误差，让科研数据更精准、可靠，助力我们深挖基因的奥秘，解锁生命底层的运作逻辑。 想知道具体怎么操作这个重要实验吗？ 小金精心制作了操作流程视频，把每个步骤、每个细节都毫无保留展示出来，不管你是科研新手，还是想巩固知识的老手，这视频都不容错过哦~ PS:作为核/ 膜蛋白#酵母双杂交 建库当中的重要环节，双链cDNA纯化 ，一定要牢牢掌握哦~#抖音知识年终大赏 #实验 #生物 #科普
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DR. 晨1月前
#真实生活分享官 #真实生活分享计划 #逆转录 #实验室日常 #科研 qPCR逆转录实验操作流程 RNA 逆转录是指以 RNA 为模板合成 DNA（即 cDNA）的过程 注意： 1 防止 RNase 污染：在整个实验过程中，应尽量避免 RNase 的污染，使用无 RNase 的耗材和试剂，操作时戴手套。 2 控制反应条件：严格按照逆转录酶的要求控制反应条件，包括温度、时间和试剂浓度，以确保逆转录反应的高效进行。 3 避免气泡产生：在配置反应体系时，应轻柔操作，避免产生气泡，以免影响反应的均匀性。 cDNA 产物保存 1 逆转录反应得到的 cDNA 可以在 - 20℃或 - 80℃保存。如果短期内（数天到数周）使用，- 20℃保存即可；如果需要长期保存（数月到数年），建议在 - 80℃保存，以防止 cDNA 的降解。 2 避免频繁地冻融 cDNA 产物，因为冻融过程可能会导致 cDNA 断裂或降解。如果需要多次使用，可以将 cDNA 分装成小份保存。
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Poppy读博版1年前
今天聊一下反转录是什么以及PCR、RT-PCR、qPCR的区别是什么？ 我觉得最大的区别就是模板不一样‼️ pcr的模板是DNA，把DNA变成很多DNA RTPCR的模板是RNA，把RNA变成DNA qPCR的模板是RNA看RNA的相对表达量，或者DNA变成更多的DNA 最近好多事情更新不及时请见谅[哭惹R][哭惹R] 分享一下午昨天把自己活成段子的人生滑铁卢吧，刚洗完脸涂上了泥膜，就停水了…拿了一万张湿巾擦干净了脸但总有一种自己要烂脸的感觉 #pcr #qpcr #qpcr常见问题 #rtpcr#跟着poppy涨知识
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高级健康管理师李迪3年前
最近全国疫情又严重了，几乎天天做核酸，30秒钟讲清楚做核酸工作原理。 RT-PCR实时荧光增量分析法。 PcR是指对RNA反转录CDNA进行扩增。扩增很多DNA再与引物（已知新冠病毒遗传信息）比较。结构一样，那么光谱分子就一样就会发光。。
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ELISA@威奥实验室1月前
qPCR逆转录 一、实验目的 将提取的总RNA模板逆转录为cDNA，消除RNA易降解、结构不稳定的特性，为后续实时荧光定量PCR（qPCR）提供稳定的扩增模板，确保qPCR实验的准确性与重复性，用于目标基因的表达量分析。 二、实验原理 在逆转录酶（Reverse Transcriptase）的催化下，以RNA为模板，根据碱基互补配对原则，以引物（Oligo dT、随机引物或特异性引物）为起始点，利用dNTPs合成与RNA互补的cDNA链。该过程可分为引物结合、链延伸两个核心步骤，最终形成RNA-cDNA杂交链，经逆转录酶的RNase H活性降解RNA链后，得到完整的cDNA单链，可作为qPCR的扩增模板。 三、实验步骤 （一）实验前准备 （二）第一步反应体系配制与预处理 （三）混合酶液提前配制 （四）第二步反应体系补加与孵育 （五）cDNA模板保存 四、注意事项 五、结果判断与后续应用 结果判断：通过核酸浓度测定仪检测cDNA浓度，A260/A280比值应在1.8-2.0范围内，说明cDNA纯度良好；若比值异常，可能存在RNA残留或蛋白污染，需重新优化逆转录体系。 后续应用：cDNA模板用于qPCR时，建议每20 μL qPCR体系中加入1-2 μL cDNA（约50-100 ng），根据目标基因表达量调整用量，按qPCR实验流程进行扩增与结果分析。#实验 #科研 #qPCR #逆转录
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带带在华科1月前
PCR、RT-PCR、qPCR、RT-qPCR他们之间的区别与联系？ 各种PCR到底是什么？ 为什么RNA需要逆转录到cDNA才可以做实验？等等 希望可以帮助到大家～#带带的研究生日常 #PCR#实验室日常
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生物侯老师3年前
如何从细胞中提取mRNA，通过mRNA逆转录出来的cDNA有什么用呢？#高中生物 #基因工程#mRNA #cDNA #逆转录
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核小体生物1年前
生物转录与逆转录有什么区别？#生物实验室 #科研 #DNA #RNA #生命科学
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浙大小王博士2年前
#创作灵感 医学博士生带你体验科研实验之RNA逆转录合成cDNA#医学生
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ZFM5月前
手把手教你做好逆转录（RNA→cDNA）❗ 湾区生物的逆转录试剂盒可以直接在一个试管里去除基因组DNA➕逆转录，操作比较简单，程序也很快～ 1️⃣如何确定逆转录RNA的量？ [向右R]一般试剂盒会给一个体系能逆转录的RNA 模板质量范围，我一般选最大的，比如湾区生物的这个说明书就写了1pg-3μg，所以我选3μg进行逆转录，根据提出来的RNA浓度计算体积即可 2️⃣加样小tips：先加便宜的再加贵的（即使前面加错了也不会浪费很多）；先加同样的试剂（可不换枪头）；比如逆转录时我先加水再加RNA再加mix，节省时间和成本 3️⃣小体系混匀时尽量不要枪头吹打，可用“瞬离-弹管壁-瞬离”以混匀体系；其它小tips可看视频～ #科研日常 #科研 #逆转录 #实验小技巧 #研究生
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艾迪基因3周前
精准编辑单碱基：先导编辑技术如何工作？ 超过一半的遗传病源于DNA单碱基错误。传统CRISPR技术通过切断双链进行编辑，可能引入不可控突变。本视频讲解新一代“先导编辑”技术：它如何在不切断DNA双链的前提下，利用pegRNA引导与逆转录酶，直接、精准地实现碱基替换、插入或删除。艾迪基因带你深度了解这一更安全、更精准的基因编辑前沿工具。 #先导编辑 #精准编辑 #科普 #DNA#艾迪基因
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苏州阿尔法生物3月前
分子生物学前沿技术-逆转录子编辑器 要做到精确定点基因编辑，非得付出 DNA 双链断裂的代价吗？当传统编辑策略遇到效率瓶颈和潜在风险时，我们能不能找到更精准、更安全的替代方案？#基因编辑 #crisp #DNA #苏州同城 #阿尔法
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一粒小米4年前
协同进化，相互淘汰，留下的都是佼佼者#病毒 #协同进化 #逆转录 #进化论 #生物科普
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AI882周前
你体内的8%是丧尸代码。简介： 你的DNA里写满了病毒的“到此一游”。揭秘逆转录病毒如何帮助人类进化出胎盘。病毒其实是进化的黑客？#基因 #病毒 #进化论 #生命起源Tags： #冷知识
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核小体生物1年前
逆转录与反转录的区别#生命科学 #逆转录 #反转录 #DNA #RNA
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启研生命3周前
实验党请进，qPCR完整实验三步走▶️ 📝RNA提取→逆转录→qPCR的完整流程 每一步的关键要点都标出来了，帮助大家减少卡壳和重复实验~ 1.RNA提取实操 样品处理——离心操作——纯化步骤——洗脱回收 2.逆转录操作 加样操作——反应程序——样品保存 3.qPCR操作 体系配制——仪器设置——结果分析 三步走！！整个RNA提取、逆转录、qPCR的实操流程就结束啦，每一步都要细心哦，细节决定实验成败～ #科研 #科研学习 #实验 #研究生 #实验室日常
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SCI 科研助手1月前
逆转录效率低下？系统性梳理实验核心。 #逆转录 #科研 #科研实验 #实验发文 #RNA
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诺唯赞4年前
【唯赞学堂】 第二期 逆转录原理及解决方案
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北京奕达酶源生物技术有限公司10月前
什么是逆转录酶？逆转录酶的作用和应用领域？ #端粒酶 #生物酶 #逆转录酶 #基因工程 #DNA
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云鹏生物3周前
高中生物易混淆辨析：逆转录PCR和反向PCR #高中生物 #学霸秘籍 #高考 #寒假学习 #基因工程
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暴躁仙女🧚5年前
今天逆转录完了～明天actin走一波～然后直接上荧光定量了#实验室日常 #工作#博士
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观月_Mizuki（cos后期版）11月前
关于我用什么设备/软件这件事 今天都告诉你啦！ #cos #cos后期 #修图软件 #软件分享 #p视频
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科晋生物丨清风5月前
📝科晋实验日记：RNA逆转录 🧪 专业分子生物学平台，标准化流程📋+经验丰富团队👨，确保高质量结果💯 我们可提供： 分子生物学 🧬：qPCR、Western Blot、载体构建、病毒包装 细胞生物学 🔬：原代分离、细胞培养、功能检测 病理学：HE染色、免疫组化、特殊染色，多重免疫荧光 免疫学：流式细胞术、流式分选 动物实验 🐭：疾病模型构建、药效评价 组学服务 📊：转录组、蛋白组、代谢组分析 🌟 高效解决实验难题，加速科研进展🚀 💡 欢迎咨询，获取免费实验方案！ #科晋生物 #实验室日常 #研究生 #实验外包 #分子生物学
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医瑞小贝3年前
如何做逆转录反应实验，#分子生物学 #实验室日常 #科研日常
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ELISA@威奥实验室2年前
一看就会的qPCR逆转录实验~ 1、加样，加入第一部分试剂 涡旋、离心、上机 (等待时间，配制Mix) 至第一部分结束,取出八连管 2、加入Mix、涡旋、离心、上机 完成后取出，-20°C储存备用 #qPCR #实验室日常 #pcr #科研
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上海密码子7月前
实验干货｜RT-qPCR实验流程 SYBRPRIME qPCR Kit (Fast HS) 优势： 高稳定性：新型 SYBR 染料与双链 DNA 特异性结合，稳定性极高，反复冻融 10 次后仍能获得一致的 Ct 值，而 SYBR Green I 冻融后会产生 PCR 抑制剂。 高效抑制非特异性产物：配合高效的 PCR 缓冲体系、新型 SYBR 染料和快速热启动 SP Taq DNA Polymerase，能有效抑制非特异性产物及引物二聚体的产生，显著提高 PCR 效率，增加结果的稳定性。 快速热启动：含有特殊修饰的快速热启动 SP Taq DNA Polymerase，在升温过程中自动释放活性，无需格外设置高温激活时间，整个 PCR 反应过程比普通热启动 PCR 节省约 50 分钟，大大缩短获得定量结果的时间。 快速反转录试剂盒 (with dsDNAse) 优势 高热稳定性：反应温度 42-55℃，有助于 RNA 二级结构打开。 逆转录能力强：逆转录酶产物得率更高，获得的 cDNA 片段更长，模板使用范围更广，合成片段≤15kb。 无 RNase H 活性：避免第一链 cDNA 合成过程中 DNA/RNA 杂交体中模板 RNA 被降解，保证第一链 cDNA 合成量和长度。 特异性去除基因组 DNA：新型 dsDNase 能够特异性去除双链 DNA，而不消化 RNA 样品、逆转录引物及合成的 cDNA，并且具有热敏感性，可在 55℃快速不可逆失活，实现去除基因组污染与逆转录反应同步进行，保证定量结果更准确。 #科研 #实验 #pcr实验 #RT-qPCR #实验流程
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科研陈冠希3月前
RT-qPCR之逆转录教程来了 #Pcr #实验室日常 #做实验 #实验外包 #生物医学科研
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小尼-尼菈4周前
尼菈新赛季最新出装天赋教学#英雄联盟 #尼菈
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段老师的科研笔记3周前
还不会逆转录实验的研0们快进来学~ #研究生 #科研日常 #逆转录 #实验室日常 #生物实验 #实验外包
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信天翁GOONIE4周前
逆转录上样量自动计算器#信天翁生物 #逆转录 #科研 #信天翁生物计算器 #实验室日常
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政崽1年前
两分钟学会逆转录 一起来学逆转录#研究生日常 #实验室日常 #科研 #医学生 #PCR
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做抗体的二哥5月前
mRNA 不稳定？转成 cDNA 就稳了，操作超简单 为啥制备 #cDNA ？因为 #mRNA 易被降解，还不能直接当 PCR / 测序模板，转成 cDNA 更稳定，也能支持下游分子实验。做法超简单：用逆转录酶，以 mRNA 为模板，加引物、dNTP 和缓冲液，42-55℃反应后，80℃以上加热 10 分钟让酶失活，就能得到可用的 cDNA～#科研 #PCR#抗体
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边界行者3周前
没有病毒，就没有人类！ 不要以为病毒只是杀手。在你的DNA里，藏着8%的病毒遗产。甚至，如果没有远古病毒的“入侵”，哺乳动物根本进化不出胎盘。我们，其实是行走的病毒共生体。 #科普 #病毒 #进化论 #生命起源 #硬核知识
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进化剧场4月前
逆转录病毒#科普一下 #涨知识
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聚猿创团队橘猫老板3年前
细胞改造计划-下#万物皆可达 #抖音夏日光合季#现在的短视频行业有多拼 #创造力计划 #闪光的一平米
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段老师的科研笔记2月前
qPCR总出错？一个视频让你提高实验成功率！ #科普一下 #研究生 #生物实验 #实验室日常
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里禾峤一8月前
28岁医学女博士高能量实验的一天 #医学博士 #科研 #医学生 #研究生 #研究生日常
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华夏探险家2年前
端粒酶逆转录酶（TERT），它的功能是维持端粒的长度。在我们的细胞中，端粒位于染色体的末端，其作用是保护染色体不受破坏。每次细胞分裂，端粒都会缩短一点，当端粒变得过短，细胞就不能再分裂，进入衰老或死亡的阶段。因此，端粒的长度被认为是影响细胞寿命和衰老过程的重要因素。 TERT基因在许多组织中的表达通常是关闭的，但在一些特殊的细胞类型中，如生殖细胞、干细胞和某些免疫细胞中，TERT基因是活跃的，这些细胞需要不断地分裂和更新。通过激活TERT基因，这些细胞可以产生端粒酶，这种酶可以使端粒重新变长，从而避免细胞衰老和死亡。 然而，TERT基因的激活也有可能导致癌症。癌细胞通常是由正常细胞变异而来的，它们的特点是可以无限制地进行分裂和生长。这种无限分裂的能力部分归功于TERT基因的异常激活，因为这样可以使癌细胞中的端粒保持足够的长度，使癌细胞避免衰老和死亡。因此，TERT基因和端粒酶在癌症的发生和发展中起着重要的作用，这也是当前癌症研究的重点之一。 因此，对于TERT基因的研究不仅可以帮助我们理解细胞衰老和寿命的机制，也可能为癌症的治疗提供新的思路和方法。 #科普一下 #生命科学 #细胞 #端粒 #衰老的秘密
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红果-漫剧新番1月前
末世天赋为王，F 级废柴激活系统，驭 SSS 机甲战姬踏碎废 #抖音短剧新番计划 #因为一个片段看了整部剧 #一定要看到最后 #一口气看完系列 #开局被背叛反手觉醒机甲女神
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张斯坦8月前
录了一个教程，就是如何把无人机拍摄的全景碎片利用ptgui合成一张全景图，并对全景图进行无缝补天的教程，欢迎收看 #全景合成 #ptgui #补天
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自古深情留不住相识一场皆过客7月前
#男性觉醒#
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麻雀王5月前
合成生物学助力生物制造 #科普
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生命视界-老栾说5月前
胎盘里的病毒基因 人类的胎盘是在一个古老病毒的帮助下建成的，也就是说没有这个病毒基因，就没有胎盘，可能也就没有人类。这个病毒基因叫做合胞素（Syncytin）。#病毒 #胎盘 #科普 #合胞素 #人类进化
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1点点大王11月前
qPCR——一个让人点样点到红温的实验🧪 #科研日常vlog #生物实验室 #生物分子学实验
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佳学生物10月前
高中生物视频素材:反向PCR
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无涯科普9月前
要想不得脂肪肝，就要学会调理肝脏。#脂肪肝 #健康 #科普 #生活
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成分研发师紫薇1月前
三款抗老科技 NAD+ 麦角硫因 PQQ #麦角硫因 #抗衰老 #抗老 #nad #pqq
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黑咖聊基因4年前
怎样了解端粒酶#科普#减肥#@DOU+小助手
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陈根谈科技7月前
武汉病毒所再发现，挖出病毒进化“残影” #热点 #科普一下 #dou是知识
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小萌2天前
多nang 的姐妹一定要看看#多囊#女性健康#saboos肌醇#多囊备孕
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精神科袁医生7月前
想要抑郁一天比一天好，记住这3种营养，安全有用 #抑郁消除计划 #抑郁 #抖出健康知识宝藏 #医疗健康创作训练营 #医学科普@DOU+小助手
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考试知己医学检验备考课堂5天前
临床检验考试 分子生物学 #医学检验技术 #医学检验职称考试#卫生资格考试#检验中级#检验技术
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王毅能9月前
曾經是貴族的專屬品！如今是富人的续命品也是人們長壽的細胞營養品！本品來自美國🇺🇸矽谷K 2 L T長壽科技進口、產品獲得F D A認証通過！具有權威的安全保障！且效果立竿見影！可以放心使用🙏
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