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Co-IP实验详细步骤➕tips❗ ✅Co-IP操作关键点 样本制备:总蛋白提取; Input制备与检测:目标蛋白表达分析; 免疫共沉淀 :“总蛋白-抗体-protein A/G磁珠”孵育; 洗涤:漂洗次数; 洗脱:非变性和变性法; 检测:WB和质谱。 ✅Co-IP中的一些实验小tips: ①样本处理:裂解液加足量的蛋白酶抑制剂,防止蛋白降解 ; ②孵育温度:磁珠与抗体复合物孵育需全程 4℃,避免室温孵育导致非特异蛋白结合增多,增加背景干扰 ; ③抗体:一抗分装-20℃冻存,避免反复冻融 ; ④检测对照:内源IP需设 Input、IP、IgG 对照组;信号弱可加增加上样 5-8μL 或适当延长曝光。 如何选择哪种CoIP❓ ✅追求结果的生理真实性和可靠性,还有好用的内源性IP抗体,那必须冲内源性 Co-IP!这可是证明蛋白天然互作的 “金标准”,稳得很~ ✅ 要是想快点筛结果、研究功能域/突变体,或者内源性抗体不好用甚至压根没有?选外源性 Co-IP就行!灵活又好操作,完全能满足需求。 💕如果您在做IP过程中碰到了抗体轻重链污染问题,我们还能帮您解决麻烦: ①标签Co-IP:选择标签纳米抗体磁珠(Flag,HA,V5,GFP,RFP可选); ②内源Co-IP:选择IP专用二抗。 有需要的同学们可以联系我们辉骏生物~ ps:我们还提供Co-IP试剂盒以及IP-MS、pull-down MS质谱鉴定服务~~若您在蛋白互作实验上还有疑问,欢迎咨询我们。#科研 #科研日常 #coip #实验室日常 #辉骏生物
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3分钟搞懂为啥你会过敏或感冒! 免疫系统=城墙+特警?3分钟搞懂为啥你会过敏或感冒 你有没有想过,为什么有的人一到换季就感冒,有的人一碰花粉就打喷嚏?🤧 其实,这都是我们身体里的“免疫应答反应”在搞事情! 我们的身体自带一套超厉害的防御体系,主要分为两支队伍: 🛡️ 1. 非特异性免疫系统(城墙部队) · 特点:广撒网、反应快,不管你是好人还是坏人,先挡在外面再说! · 成员:皮肤、黏膜、单核吞噬细胞…… · 比喻:就像一道坚固的城墙,把所有想进城捣乱的家伙都拦在门外! 🎯 2. 特异性免疫系统(特种部队) · 特点:专一、精准、有记忆力,专门针对特定的“通缉犯”! · 成员:T淋巴细胞(细胞免疫)、B淋巴细胞(体液免疫)。 · 比喻:像训练有素的特种部队,专门识别并清除特定的病原体! 🤝 正常情况: 这两支队伍需要协同作战,城墙挡住大部分攻击,特种部队精准打击漏网之鱼,我们才能健健康康! ⚠️ 异常情况: 如果这套系统失调了,麻烦就来了: · 功能下降 😴:城门大开,特种部队没力气,结果就是动不动就感冒,容易感染。 · 功能亢进 😫:太敏感了,分不清敌我!看到花粉、尘螨都以为是大怪兽,上去就干,结果就是过敏(鼻炎、皮疹),严重时甚至攻击自己身体,导致自身免疫性疾病。 💡 总结: 免疫力不是越强越好,而是平衡才最好! 既不“城门失守”,也不“过度内战”,这才是身体健康的关键哦! #过敏应对 #花粉过敏 #春季过敏 #免疫系统知识 #过敏预防
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