00:00 / 03:07
连播
清屏
智能
倍速
点赞111
00:00 / 11:34
连播
清屏
智能
倍速
点赞5
植物丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 一、测定意义: MDA是膜脂过氧化最重要的产物之一,它的产生还能加剧膜的损伤因此在植物衰老生理和抗性生理研究中MDA含量是一个常用指标,可通过MDA了解膜脂质过氧化的程度,以间接测定膜系统受损程度以及植物的抗逆性。 二、测定原理: 在酸性和高温度条件下,MDA可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的产物,其最大吸收波长在532nm。且植物组织中蔗糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm,但532nm处也有吸收。测定时需去除这部分干扰。从而准确计算出样本中丙二醛的含量。 三、试剂组成: 四、操作步骤: 样本前处理 植物组织提取液的制备:取一定量植物组织擦净水分及杂质,剪碎后放入研钵,加入液氮,研磨成粉状后转移出来,然后准确称重,按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称重0.1g,加入提取液1mL),旋涡混匀抽提3-5分钟或者使用组织破碎仪冰浴提取,8000g ,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 测定步骤 1、测定前将试剂恢复至常温。 2、操作表: MDA标准品的稀释:取适量标准品用蒸馏水稀释至1、2、5、10、20、50µmol/L,制作标准曲线。 蔗糖标准品的稀释:取适量标准品用蒸馏水稀释至0、2.5、6.25、12.5、25、62.5、125mmol/L,制作标准曲线。 按照操作表将样本和试剂加入带盖的离心管中,混匀,于沸水浴上反应20min,迅速冷却后,4000rpm/min常温离心10分钟。取上清液200μL于96孔板中,测定450、532、600nm波长下的吸光度值。 五、植物样本中丙二醛含量计算: 蔗糖标准曲线:以不同浓度的蔗糖标准品测定的 A450值为横坐标,A532值为纵坐标,拟合其直线方程,从而算出糖分在532处的吸光度值Y532。Y532 = 0.0614x - 0.0016,R² = 0.9983。 六、注意事项: 1、部分植物组织中MDA含量较低,需要加大样本取样浓度。 2、沸水浴时候,注意离心管的盖子一定需要盖紧。最好是使用带旋盖的管子。 3、试剂一会有沉淀析出,可以沸水浴加入,使其完全溶解。#实验室日常 #酶活检测
00:00 / 01:02
连播
清屏
智能
倍速
点赞16
00:00 / 03:20
连播
清屏
智能
倍速
点赞5
00:00 / 52:41
连播
清屏
智能
倍速
点赞55
00:00 / 10:33
连播
清屏
智能
倍速
点赞18