【高中物理推荐】高中物理如何学习才能有效提分，一定要拿下黄夫人物理！#物理 #高中 #高考

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发布时间：2025-11-26 12:29

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高中生物选三第60题 60莫内林是从一种西非植物的浆果中分离提纯到的甜味蛋白，甜度是蔗糖的3000倍左右。下图 1所示利用大肠杆菌生产莫内林，其中M基因可表达合成莫内林。表1是为PCR扩增M基因设计的引物，画线部分是所需使用的限制性内切核酸酶的识别序列。 Ampr为氨苄青霉素抗性基因，氨苄青霉素可抑制细菌细胞壁的形成，对真核生物生长无影响限制性内切核酸酶识别序列及切割位点：(1)若选用XhoI和Sau3AI对质粒A进行切割，为实现其与目的基因的连接，可在目的基因两端添加_____。引物1的结合位点可能在____(选填图1中的编号)。引物1的画线部分序列在A中______(有/没有),引物2画线部分的序列在B中_____(有/没有)的可能性较高。 (2)已知C中的培养基成分有水、酵母粉、蛋白胨和氯化钠，并按一定比例添加氨苄青霉素。将 C中有生长优势的菌落经多次______后作为菌种在发酵罐中培养，积累产物，发酵罐中培养基成分与C中培养基相较可不添加_____,并采用____的方法对装填在发酵罐中的培养基灭菌。 (3)通过大肠杆菌生产的莫内林甜度较天然莫内林大为降低，天然莫内林也易因温度等因素导致甜度降低甚至甜味消失，科学家分析其中的原因并进行了后续的工程学改造，请结合所学知识，分析两种莫内林甜度降低的原因分别是_____。 (4)针对上述问题，从分子水平对蛋白质进行改造是解决莫内林甜度降低的工程学思路。以甜味蛋白质的三维结构为基础，选择影响其与受体相互作用的关键氨基酸残基，进行定点突变，将获取的新基因与酵母质粒中构建_____,导入到真核细胞如甲醇营养型毕赤酵母中，并评价突变体的功能，筛选能产生_______等优良性能的甜味蛋白质的菌种。研究结果表明，相对于天然的野生型甜味蛋白质monellin,突变体E2N/E23A的甜味均提高了约3倍左右，而突变体E2N/E23A的热稳定性(Tm值)提高了约10℃。 (5)接上题，与大肠杆菌转化不同，毕赤酵母转化前一般先用低温山梨醇溶液处理，使其处于一种____的生理状态；同时需将外源DNA处理成线性，分析原因可能是_转化后的毕赤酵母进行发酵培养分为两个阶段：生长阶段，以甘油为碳源、获取大量的功能性细胞；诱导阶段，通过添加甲醇来诱导表达重组蛋白。培养基中除加入甘油、甲醇外，还需要提供的营养物质有_
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