transwell小室重复使用步骤

首先在剩下的孔里加入八百微升的百分之四多聚甲醛，用于固定， 然后用镊子夹起小试，用 e、 p、 b、 s 清洗。清洗的方式就是像用小试舀水一样，重复几次小试洗完后，依次放入刚刚加好多聚甲醛的孔中， 全部洗完放好后，在上市中也加入两百微升的多聚甲醛。加好后用锡纸避光，放肆度中进行三十分钟的固定。 固定结束后准备一个新的十二孔板，在对应的孔里加入八百微升的结晶紫染色液，我用的是索莱宝的。接着将上市中的多聚甲醛倒出来， 直接将小试依次放入刚刚加好的染色液中，这里无需清洗多聚甲醛。最后在上市中也加入两百微升的染色液，这里视频没录到，全部加好后也是避光，在四度中染色二十到三十分钟。 在染色过程中，我们提前准备好双头棉签，并用 pbs 浸湿，再准备一个烧杯，倒入 pbs 纸巾和后面用于观察的再拨片。 清洗染色液的方式和前面清洗培养基的方式一样，上市的染色液可以倒回孔板中，染色液可以回收再利用，清洗完后倒扣在纸巾上。 接下来最关键的一步就是要用棉签擦掉上市的细胞，先用圆的那一头棉签将上市中间的细胞擦掉， 再换成尖的那一头棉签，擦上市的边缘，不用太小心翼翼，这个膜没那么容易破，用的棉签也尽量买这种双头一头圆一头尖的，这种很好用。擦完后再用 pbs 一下，洗掉残留的染色块会干净很多。 然后再在拨片上滴一滴 pbs， 每个小时一滴，最后将小石沿着水滴边缘慢慢放上去，排出气泡，这样就可以用于观察了，成片在此。