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贴壁、悬浮细胞处理全流程(手把手教学)✌️ 具体内容看视频 贴壁细胞处理要点: ✅1.细胞离心之后用培养基重悬轻柔吹打10次,一定要消化彻底,这样细胞才会一粒一粒的不抱团生长 ✅2.细胞重悬液加入培养皿后晃匀,画“粪”字 ✅3.重点:晃匀之后检查有无气泡🫧,如果有气泡赶紧弄掉,戳破。 ✅4.重点:晃匀之后静置2分钟,静待细胞沉底,细胞沉底之后去显微镜下观察,此时的细胞未贴壁只是沉底,此时的细胞均匀度大概率就是细胞贴壁之后的均匀度。 因此:沉底的细胞看着均匀,就可以放入培养箱,如果不均匀,重新摇晃。 悬浮细胞处理要点: ✅1. 细胞状态佳的话,传代可直接传代,把一皿的细胞1分为2,然后往2个皿中补新的培养基。 ✅2.细胞长到90%再传代,和贴壁不太一样,贴壁细胞因为是贴壁长,要及时传代,而悬浮细胞是悬浮在培养基中生长,因此不用一直处理或传代太多,细胞密一些反而生长效果好。 最近在用蕊特生物的新型完全培养基,还蛮好用的,安利一波~ 瓶内部自带血清和培养基粉末,直接一按一晃,混匀就直接用,很方便❗️ 无需解冻血清配置,大大减少了解冻血清的时间~而且也降低了细胞污染概率,之前我们组有人分装血清把血清搞污染,直接全军覆没… 而且细胞培养效果也比较稳定,目前测过HeLa,293FT和悬浮某浆细胞,培养都没啥问题 固液未分离状态可4度保存2年,分离混匀后尽快使用❗️ 常用的种类都有哦,DMEM低糖or高糖,MEM,1640✌️ #科研狗的日常 #研究生 #读博的日子 #细胞实验 #科研
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