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口服疫苗如何无损直达肠道?郑州大学新发文:工程菌+组学验证 本文开发了一种名为 Bac^OR-Fn-T+phiX174的工程化益生菌口服疫苗系统,用于肿瘤免疫治疗 。该系统利用大肠杆菌作为底盘,内部装载基因编码的双抗原(OVA 和 TRP2)铁蛋白纳米颗粒,表面修饰 RGD 肽以靶向肠道 M 细胞 5555。通过阿拉伯糖诱导细菌原位裂解,释放纳米颗粒,有效克服了胃肠道降解和粘膜摄取效率低的难题 6。实验证明,该疫苗能诱导强效的 CD8+ T 细胞反应,显著抑制黑色素瘤的肺转移和皮下生长 7。关键是,研究利用 16S rRNA 测序 证实了该活菌疫苗不会破坏肠道菌群稳态,具有高度安全性。 关键方法: 1、基因工程菌构建: 使用 pET22b 和 pBAD33 质粒构建表达铁蛋白抗原和 phiX174 裂解基因的大肠杆菌系统。 2、纳米颗粒表征: 采用透射电镜 (TEM) 和动态光散射 (DLS) 分析铁蛋白纳米颗粒的形态和粒径 (~16nm) 。 3、免疫学分析: 使用流式细胞术 (Flow Cytometry) 分析树突状细胞 (DC) 成熟度及 T 细胞亚群(CD8+, CD4+, Treg)。 4、动物模型: 构建 C57BL/6 小鼠 B16-F10-OVA 黑色素瘤肺转移和皮下瘤模型进行药效评估 12121212。 5、微生物组学分析 (数据集): 对小鼠粪便样本进行 16S rRNA 基因测序,分析 Alpha/Beta 多样性及菌群丰度 (Bioinformatics)。 主要结果: 1、裂解效率: 阿拉伯糖诱导 8 小时内细菌裂解率 >99% 。 2、肿瘤抑制: 在皮下肿瘤模型中,双抗原疫苗组 (G5) 的肿瘤体积约为 PBS 组的 1/4,抑制率约 75% 。 3、免疫激活: 疫苗组脾脏中抗原特异性 CD8+ T 细胞显著增加,Treg 细胞显著减少 。 4、安全性 (生信指标): 16S 分析显示,疫苗组与 PBS 组的 OTU 数量、Shannon 指数无显著差异 (Alpha 多样性稳定),PCA/NMDS 分析显示群落结构相似 (Beta 多样性稳定) 。。 #癌症疫苗 #口服递送 . #肿瘤免疫治疗 #工程益生菌 #16SrRNA测序
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