细胞传代步骤+注意事项🔥长视频预警‼️ 细胞传代怎么操作呢❓️传代时如何避免污染❓️今天我们一起来看一下细胞传代的过程及注意事项吧~ ✅实验准备 00:05 观察细胞状态是否能够传代 打开紫外灯照射30min以上 打开水浴锅37℃温浴试剂(Cytiva培养基、血清、胰酶、PBS) 🔥所有进入工作台的试剂和物品必须用酒精消毒后才可放入‼️ ✅培养基配置 01:56 10%血清+培养基(+必要时添加1%双抗) 即5ml血清+45ml培养基(+必要时添加500ul双抗) 🔥我们实验室常用的培养基是Hyclone的DMEM高糖培养基(适用于大多数细胞的基础培养基)和RPMI培养基(比较适用于悬浮细胞),一般建议试剂分装使用减少污染❌ ✅细胞消化 03:05 弃去培养基后,加入PBS清洗细胞1-3次 弃去PBS,加入胰酶后放置37℃培养箱孵育 消化结束后加入等量/一半的培养基终止消化 🔥第一次养细胞时建议每30s观察一次消化状态,巨噬细胞等不能消化的细胞可以直接刮刀刮下来,悬浮细胞跳过消化步骤 ✅细胞传代 07:05 将消化好的细胞转移至离心管中1000rpm离心3min 弃去上清后,加入适量培养基吹打重悬细胞 分别加入新的培养瓶中,混匀,37℃培养 🔥吹打混匀时需要小心轻柔吹打,防止剪切力过大伤害细胞。放置培养箱后需确保液面水平‼️ #细胞培养 #细胞实验 #Cytiva科研好物时刻 #细胞传代 #实验室日常
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活性氧(ROS)检测试 一、检测意义及原理: 活性氧(reactive oxygen species,ROS)广泛指代氧来源的自由基和非自由基,在机体内,ROS的主要来 源之一是线粒体内膜的呼吸链底物端,在线粒体中的电子传递链复合物将电子传递给O2的过程中,有一部分 O2被还原,形成O2-或H2O2。其中,最为重要的是O2-,它是大部分的ROS的前体,主要由线粒体内膜呼吸链 中的蛋白酶复合体Ⅰ、Ⅲ产生。在生物学背景下,ROS形成为氧的正常代谢的天然副产物,并且在细胞信号传 导和体内平衡中具有重要作用。然而,在环境压力(例如,紫外线或热暴露)期间,ROS水平会急剧增加。这 可能会对细胞结构造成严重损害,这被称为氧化应激。 二、试剂盒特点: 1. 检测仪器 :重要实验设备仅需要酶标仪即可完成。 2. 微孔板法 :操作方便,流程简单,无需复杂的前处理。 2. 结果统计 :结果判断与计算简便,读数最快5秒,酶标仪便可对结果直接计算并导出表格。 3. 大通量操作:本试剂盒反应敏感度适中,实验结果稳定,不会出现因为2~3min之时间差导致前后加样各组 实验结果变化很大的情况。因此可一批次操作多个样本,从而提升实验效率。 三、注意事项: 1.检测时所有试剂都要恢复到室温,试剂盒开封后剩余试剂放回袋中1 个月内用完。 2.实验前请认真仔细阅读此说明书,说明书以试剂盒内纸质版为准。 3.当检测样品的值高于空白孔的值时,说明此样品中SOD的含量较低或样品中受其它物质含量的影响交大,舍 弃此样品或更换其它检测方法。 4.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断! 💸【价格暴击 直击痛点】 ✅ 96T全线指标:仅需700¥(均价低至7.3¥/样) ✅ 48T尝鲜装:仅需500¥ 🎯【懒人福音 代测服务】 ➡️ 液体样本:免费代测!(没错,免费!) ➡️ 按样品收费:最低10元/样起(适合小批量实验) 从此不用熬夜做检测,数据直接发邮箱! #生化 #ROS #细胞实验 #活性氧ros检测
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