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Trizol法提取RNA实验流程 一、实验原理 Trizol试剂是一种单相裂解液,主要成分包括酚、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等。其中,异硫氰酸胍可破坏细胞结构,抑制RNA酶活性,防止RNA降解;酚能使蛋白质变性沉淀,与水相分离;β-巯基乙醇可进一步保护RNA的巯基不被氧化。通过离心分层、异丙醇沉淀、乙醇洗涤等步骤,可从细胞或组织中分离出纯净的总RNA。 二、实验操作流程 第一步:样品预处理 第二步:裂解反应 第三步:分层处理 第四步:RNA沉淀 第五步:RNA洗涤 第六步:干燥与溶解 第七步:RNA保存与检测 ✨【上海威奥生物 · QPCR专业代做服务】✨ 把专业的事交给专业的人,解放你的双手和发际线! 💎 我们为什么值得托付? ✅ 专业团队,经验满格 • 超10年实验经验老师傅亲自操刀,各种疑难样本轻松拿捏 • 从细胞、组织到血液、细菌,处理经验超丰富 ✅ 高端平台,精准护航 • 全系Applied Biosystems高端qPCR仪,结果稳定可靠 • 严格分区操作,全程杜绝污染,数据真实可重复 ✅ 一站服务,省心到底 • 样本寄来就行! 从RNA提取、质检、反转录到上机、分析,我们全包 • 提供完整实验报告+原始数据,图表可直接用于文章发表 ✅ 周期飞快,效率惊人 • 标准流程3-5个工作日内完成,加急服务等你来撩 • 再也不怕 deadline 追在屁股后面跑啦 ✅ 绝对保密,隐私无忧 • 签署保密协议,你的课题信息绝对安全 • 数据只属于你,我们只是专业的“生产工” 📊 我们提供的不仅是数据,更是你文章里的Figure和心安! 🌈 服务亮点速览: ▪️ 基因表达量检测 ▪️ miRNA/siRNA干扰效率验证 ▪️ 基因分型/SNP检测 ▪️ 绝对/相对定量分析 ▪️ 提供专业的数据解读建议 🎯 适合这样的你: • 实验新手,急需可靠数据推进课题 • 时间紧迫,被投稿截止日期疯狂催更 • 遇到技术瓶颈,重复多次结果仍不理想 • 追求高效率,想把时间花在更重要的课题设计上 别再让不稳定的实验偷走你的时间和好心情了! 把专业的事交给我们,你去喝杯咖啡,等待漂亮的数据和图表到手~☕️ 👉 欢迎小窗咨询,获取详细服务清单和报价! 📌 记得关注我们,获取更多科研实验小技巧和服务优惠哦! #科研日常 #QPCR #实验服务 #实验外包
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1.材料与试剂 海酸钠(中粘度,1000-1500 mPa.s,1%水溶液) 氯化钙(CaCl:2H20,分析纯) 纳米羟基磷灰石(粒径<100 nm) 壳聚糖(脱乙酰度>90%,分子量100-300 kDa)明胶(TypeA, 300 Bloom)重组人BMP-2 氯化锶(SrCl-6H20,分析纯) 醋酸(分析纯) 磷酸盐缓冲液(PBS,PH 7.4) 戊二醛(25%水溶液,用于交联) 无水乙醇(分析纯) 超纯水 2. 设备 磁力搅拌器 匀浆机 超声分散器 冷冻干燥机 真空干燥箱 紫外分光光度计 扫描电子显微镜(SEM) 红外光谱仪(FTIR) 万能材料测试机 超低温冰箱(-80°C) 恒温水浴锅 pH计 3.氧化海藻酸钠的制备 将10 g海藻酸钠溶解于500 mL超纯水中,充分搅拌至完全溶解。 在冰浴条件下,缓慢加入2.68g高碘酸钠(NalO4),避光条件下搅拌反应6小时。 加入10 mL乙二醇终止反应,继续搅拌30分钟。 使用透析袋(截留分子量3500 Da)在超纯水中透析3天,每天更换透析液3次。 将透析后的溶液冷冻干燥得到氧化海藻酸钠粉末,密封保存于4°C冰箱。 4.纳米羟基磷灰石/海藻酸钠复合材料的制备将1 g海藻酸钠加入50 mL超纯水中,磁力搅拌至完全溶解(约2-3小时)。 称取0.3g纳米羟基磷灰石(nHA),加入10mL超纯水中,超声分散15分钟形成均匀悬浊液。 在搅拌状态下,将nHA悬浊液缓慢滴加到海藻酸钠溶液中,继续搅拌4小时确保充分混合。 将混合溶液超声处理20分钟,消除气泡并进一步分散纳米粒子。 5. 壳聚糖溶液的制备 将0.5 g壳聚糖加入50mL 1%醋酸溶液中,室温下磁力搅拌过夜至完全溶解。 用1mol/L NaOH溶液调节pH至6.0。 过滤除去不溶物,得到澄清的壳聚糖溶液。 6.BMP-2的包封 称取20mg明胶于10 mL PBS中溶解,40°C水浴加热溶解。 冷却至室温后,加入10 w9重组人BMP-2,轻柔混合均匀。 将BMP-2/明胶溶液与15 mL上述制备的nHA/SA复合溶液混合,在4°C条件下搅拌2小时。 7.锶离子的引入 配制0.1mo/L的SrCl溶液。 按1:20的体积比将SrCl溶液缓慢加入到上述复合溶液中,室温下搅拌1小时。 #水凝胶 #水凝胶合成 #医学实验 #纳米材料 #医学科研服务
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