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高效液相色谱(HPLC)测定样品前处理流程 HPLC测定化合物,前处理是将目标化合物从样品中提取出来。先弄懂样品中目标化合物的物理和化学性质。 1.先动手研磨,样品的体积(如植物叶片)太大,需要研磨的很细,至面粉状均匀。样品量不要超过研钵的1/3,对热敏感的要用液氮研磨,避免破坏有效成分。对于科研方面,植物或动物组织等,可采用高通量组织研磨仪,粒度≤50um。 2.看样品能溶解到哪种溶剂里面。如果样品含有极性基团(如-OH,-COOH),选择易溶的极性溶剂(甲醇、乙腈、纯水);如果含有非极性基团(如苯环、烷基链),可选择非极性溶剂(如正己烷、氯仿)。所选择的溶剂,不能和流动相有冲突,因此尽量选择流动相体系。除了易溶,对热不敏感的样品,还可以通过加温方式增强溶解。 3.看这个化合物的沸点,避免因为高温而产生气泡,样品组分随着气泡挥发损失掉。沸点低的样品对热敏感,需要在低温条件下(如4℃)操作超声和离心。高沸点的样品需要用低沸点溶剂(如乙腈)溶解,可通过蒸馏或结晶分离,避免残留。了解样品在不同温度下的溶解度,在色谱柱温度设置时是需要考虑的(如35-40℃,保持溶解状态),避免析出堵塞。目标化合物提取,有的溶剂并不是100%甲醇或乙腈,是有一定比例的(如80%乙腈)。看化合物的极性大小,选择出溶解性比较好的比例。如果要破细胞壁,释放出细胞质,需超声辅助。 4.根据实验选择适合的离心(转速和时间),细小颗粒(如脂蛋白)需要高的离心力(>10000xg),较大颗粒(如细胞碎片)用3000-5000xg沉淀下来。对于LC-MS/MS的样品,一般用10000xg或以上10min,尽可能去除磷脂和蛋白,降低基质效应。转速可根据半径和离心力的公式换算出来,达到实际分离效果。注意离心温度,如4℃或室温。 5.如需浓缩处理,可用氮吹。通过调节流速和水浴温度,温和高效去除溶剂,保护有效成分不被氧化或热降解。样品体积不能超过离心管的2/3,防止溢出,操作要在通风橱内进行,避免化学腐蚀性或有机气体对人体危害。水浴温度要低于溶剂沸点3-4℃,氮气流量1.0-5.0L/min,逐步调节,避免液体飞溅。 6.采用0.45um或0.22um膜过滤。通常用聚四氟乙烯(PTFE)或聚醚砜(PES)对大多数溶剂兼容好,适合常规样品。对于蛋白质/多肽,避免使用尼龙滤膜材质,可用PVDF。#HPLC测定 #液相色谱 #检测服务
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磷化氢气体检测报告 挥发性有机化合物检测 磷化氢气体检测是借助专业设备与技术,对环境中磷化氢气体的存在情况、浓度水平进行精准分析,以防范中毒事故、保障人员安全及维护生产存储环境稳定的关键工作。​ 检测范围​ 粮食仓储环境气体、化工企业磷化物生产车间气体、半导体制造工艺尾气、制药行业含磷原料反应气体、船舶货舱熏蒸后残留气体、垃圾填埋场发酵产生气体​ 检测项目​ 磷化氢、氨气、硫化氢、一氧化碳、二氧化碳、甲烷、挥发性有机化合物​ 检测标准​ GB/T 14686-2008 空气质量 氨的测定 纳氏试剂分光光度法​ GB/T 16023-1995 车间空气中硫化氢的测定 硝酸银比色法​ HJ 540-2016 环境空气和废气 氯化氢的测定 离子色谱法​ SN/T 4278-2015 进出口粮谷中磷化氢残留量检测方法 气相色谱法​ 检测方法​ 电化学传感器法:磷化氢气体与传感器电极发生氧化还原反应,产生与浓度相关的电流信号,将信号转化为可读的浓度值。​ 气相色谱 - 质谱联用法:通过色谱柱分离磷化氢后,利用质谱仪对其进行定性识别与定量分析,提高检测精度与准确性。​ 试纸比色法:将浸渍特定试剂的试纸暴露于待测环境,试纸与磷化氢反应变色,对比标准色卡初步判断磷化氢浓度范围。​ 综上所述,磷化氢气体检测覆盖多类易产生该气体的场景,检测项目兼顾主要目标气体与关联有害气体,依据明确标准并采用科学方法开展,能精准把控磷化氢气体状况,有效预防安全风险,为相关行业的安全运营与人员健康提供重要保障。​ #磷化氢气体检测 #磷化氢气体检测中心 #磷化氢气体检测机构 #磷化氢气体检测报告 #磷化氢气体检测公司
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