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微生物琼脂 这是一种从海藻中提取的多糖物质,是制备固体培养基和半固体培养基的凝固剂,被誉为“微生物学的基石”。 核心概述 微生物琼脂,简称琼脂或琼脂粉,是一种天然、无营养的凝胶剂。它在微生物学中的核心作用是为微生物提供一个可以生长的固体表面,从而能够分离、纯化、计数和观察单个菌落。 主要特性与优势 1. 卓越的凝胶性能: · 高熔点,低凝固点:这是其最关键的特性。琼脂培养基在约95°C以上融化,冷却到约42°C以下才凝固成固体。这个宽泛的“融化-凝固窗口”允许我们在融化状态时将培养基与样品(如细菌悬液)均匀混合(例如倒入平板),然后在不烫伤微生物的温度下(42-45°C)平稳地凝固。 · 强度高:能形成足够坚固的凝胶,便于划线、穿刺等操作。 2. 微生物不可利用: · 绝大多数微生物不能降解琼脂作为碳源。这意味着它只提供物理支撑,不会干扰实验的营养成分设计。这与另一胶凝剂明胶(由胶原蛋白制成)形成鲜明对比,明胶容易被许多细菌分解液化。 3. 良好的化学稳定性: · 在常规灭菌温度(121°C高压灭菌)下稳定,不易被破坏。 · 不与大多数培养基成分发生反应,透明度高,便于观察菌落形态。 4. 安全与经济: · 无毒、可食用(常用于食品工业),且价格相对低廉。 在微生物学中的主要用途 1. 制备固体平板: · 分离纯化菌落:通过划线法,将混合的微生物样品在平板表面分散,最终长出单个、孤立的菌落,这是获得纯培养物的基础。 · 菌落形态观察:观察菌落的大小、形状、颜色、边缘、透明度等,是鉴定微生物的第一步。 · 活菌计数:通过涂布法或倾注法,进行菌落计数(CFU)。 · 药敏试验:如纸片扩散法(Kirby-Bauer法),测试抗生素敏感性。 2. 制备斜面培养基: · 用于菌种的短期保藏和扩大培养,便于接种和观察。 3. 制备半固体培养基(琼脂含量通常为0.3%-0.5%): · 动力观察:通过穿刺接种,有运动能力的微生物会从穿刺线向四周扩散生长,形成云雾状或羽毛状;无运动能力的则只沿穿刺线生长。 · 厌氧培养:半固体深层培养可用于培养兼性厌氧菌等。 重要区分:微生物琼脂 vs. 琼脂糖 · 微生物琼
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