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解锁双荧光素酶实验中miRNA与靶基因新关系 今天咱来唠唠超有趣的双荧光素酶实验中 miRNA 和靶基因序列的那些事儿~ 先看看实验材料 。 细胞可以用 293T,或者按指定,不过指定的细胞系可不保证转染效率哦。 另外还会用到烟草。 载体方面也有讲究,要把 lncRNA 序列、circRNA 序列或者转录因子 3’UTR 区序列构建到 pmirGLO 载体上,同时还要合成 mimics 及 mimics NC 。 再瞅瞅实验原理的示意图 。 这里面涉及到 microRNA 和靶基因的互动,当它们结合情况不同时,会影响荧光素酶的表达,进而影响发光情况 。 这就像一把神奇的钥匙(miRNA)去开对应的锁(靶基因),不同的匹配状况会触发不同的 “机关”~ 实验分组也很关键 。 有 pmirGLO-lncRNA PVT1-wt+mimics control 、pmirGLO-lncRNA PVT1-wt+miR-145 mimics 、pmirGLO-lncRNA PVT1-mut+mimics control 、pmirGLO-lncRNA PVT1-mut+miR-145 mimics 这几种。 尤其要注意 pmirGLO-lncRNA PVT1-wt+miR-145 mimics ,它可是二者缺一不可呢~ 这个双荧光素酶实验在研究 miRNA 和靶基因的相互作用上超有用 ,能帮我们了解基因表达调控的奥秘。 不管是做科研项目,还是探索生物学现象背后的机制,都能派上大用场! 宝子们要是对这个实验感兴趣,或者在实验设计、操作上有啥疑问,都可以来一起聊聊呀~ #生物 #实验 #科研 #双荧光素酶 #2025高考
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