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色谱定量分析:内标法与外标法解析 定量分析领域,常见的方法包括面积归一化法、内标法、外标法以及标准曲线法。其中,内标法和外标法因其相似性,常常让初学者感到困惑,难以准确区分。色谱分析的重要作用之一是对样品进行定量,而色谱法定量的依据是组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。接下来,我们将从定义、特点等角度深入剖析这两种方法的异同点及其各自的优势。 内标法 1.定义:内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(内标物是样品中没有的组分),然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液,进样得相对校正因子。再将内标物加入欲测组分的样品中,进样后测得欲测组分和内标物的定量参数。 2.内标物:内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱柱所分离,又不受试样中其它组分峰的干扰,只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值,即可求出待测组分在样品中的百分含量。 采用内标法定量时,内标物的选择是一项十分重要的工作。理想地说,内标物应当是一个能得到纯样的已知化合物,这样它能以准确、已知的量加到样品中去,它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征,最好是被分析物质的一个同系物。当然,在色谱分析条什下,内标物必须能与样品中各组分充分分离。 3.选择内标物的四个要求: (1)内标物应是该试样中不存在的纯物质; (2)它必须完全溶于试样中,并与试样中各组分的色谱峰能完全分离; (3)加入内标物的量应接近于被测组分; (4)色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近,或在几个被测组分色谱峰中间。 4.影响因素:在使用内标法定量时,影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。 化学方面因素: (1)内标物在样品里混合不好; (2)内标物和样品组分之间发生反应; (3)内标物纯度可变等。 #色谱 #定量 #测试 #检测
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