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微生物浓度测定“金标准”:一文读懂麦氏比浊法! 在微生物实验中,准确测定细菌浓度是许多关键操作的基础步骤。而麦氏比浊法正是一种经典、便捷且广泛使用的微生物浓度测定方法。无论是进行药敏试验、细菌鉴定还是配制标准菌液,掌握这一方法都至关重要。今天就带大家全面了解麦氏比浊法的原理、操作与应用。 一、原理:光与菌液的“对话” 麦氏比浊法的核心原理,是利用细菌悬浮液对光的散射作用来间接测定微生物浓度。当细菌溶于水后,会形成与其浓度相对应的浑浊液。菌悬液中微生物含量越高,对光的散射作用就越强,导致透射光减少。也就是说,在一定浓度范围内,菌悬液的浊度与光密度(OD值)成正比,与透光度成反比。 二、实验准备:这些材料你备齐了吗? 麦氏比浊管或麦氏浊度仪(内置已知浊度的标准管) 待测细菌悬浮液(如肉汤培养物) 无菌试管、移液器 无菌生理盐水(NaCl溶液) 三、操作步骤:轻松上手,步步为营 1、准备阶段 轻轻摇匀标准比浊管,确保管内悬浮液分布均匀。同时准备一个相同直径的无菌试管,用于盛放待测菌液。 2、加样与稀释 以无菌操作将待测细菌悬浮液加入试管中,再缓慢加入无菌生理盐水,并不断比对标准管,直至两者浊度接近。该过程可能需要反复调整稀释比例,建议耐心操作。 3、观察与比较 传统方法是直接肉眼观察,但容易产生误差。更推荐的做法是:在白纸上画上一组平行黑线作为背景,透过试管观察黑线的清晰程度,从而比较待测管与标准管的浊度差异。若条件允许,使用麦氏浊度仪进行测量,结果更为客观准确。 四、注意事项:细节决定成败 若菌悬液本身不澄清,需进行空白校正:即用培养物的OD值减去未接种培养基的OD值。 如果菌液颜色较深,可将未接种的培养基试管置于标准管后方再进行读数,以减少颜色干扰。 建议对测定后的菌液进行梯度稀释并涂布计数,以验证比浊结果的准确性。 该方法适用于大多数细菌,不同菌种间可能存在一定差异,但通常处于一个数量级内,可满足一般实验需求。 麦氏比浊法虽便捷,但准确度有限。若实验对菌数精度要求极高,建议结合紫外分光光度法或平板计数法。 比浊管或比浊液应贮存在室温暗处,使用前混匀,并注意检查有效期,禁止使用过期标准管。 #实验室日常 #实验室 #微生物菌种查询网 #微生物检测 #探索未知
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这两天,我们在南京化工产业展上,遇到了不少化工行业的朋友,有一个问题,被反复问到:如果样品温度高达200℃以上,我们该怎么实现在线检测? 这个问题非常典型,尤其是在聚酯多元醇,这类高温反应过程中。今天,我就以“聚酯多元醇在230℃高温下,在线近红外检测”为例,和大家分享一下,我们是怎么做的。 聚酯多元醇在生产中,判断反应终点非常关键。如果每次都取样送到化验室,等结果出来,反应早就过了最佳时机,不仅影响效率,还影响产品品质。 所以,能不能在线、实时地检测关键指标——比如羟值、酸值和粘度——就成了提升生产控制水平的关键。 面对230℃的高温物料,我们踩过坑、也总结出经验: 1️⃣ 非接触式安装,才是正解 早期我们试过探头插入式,结果高温环境下设备很容易“挂掉”。后来我们改用非接触式安装,仪器不直接接触物料,通过法兰流通池和反射板来采集光谱,完美避开高温损伤。 而且,230℃下的密封件我们选用全氟醚材质,耐高温、耐腐蚀,实测稳定可靠。 2️⃣ 大光斑设计,应对不均匀物料 化工物料常有气泡、不均匀的问题。我们用的DA-5S在线近红外仪,采用大光斑、非接触测量,能穿透视镜,即使有少量杂质附着,也不影响测量。 视镜用久了有点脏?没关系,这个场景,用重铬酸钾浸泡清洗,2-3个月维护一次,就能继续稳定使用。 我们交付了不止一家客户,建立了羟值、酸值、粘度的近红外模型。结果显示: 模型相关系数R²接近0.99,预测误差完全满足客户要求! 20个实际样品的预测标准偏差:羟值0.5以下、酸值0.1以下、粘度8.8; 数据直接传输到DCS系统,实现中控室实时判定终点,甚至形成自控闭环。 高温样品的在线检测,不是不能做,而是要找对方法。非接触+大光斑+耐高温设计,配合稳定的近红外模型,就能在230℃的环境下,实现羟值、酸值、粘度的精准、实时监测。#在线近红外 #在线水分仪 #仪器仪表 #工业自动化 #化工
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