新冠核酸基本人人都验过,帮你检测的仪器估计没多少人看过,拆解内部更是寥寥无几。今天带你见识一下 实验室新冠病毒检测的仪器内部~上集 满足好奇心长见识 拆解实验室用实时荧光定量PCR RTPCR QPCR添加荧光基团检测每次聚合酶链式反应荧光量判断各类新型冠状病毒DNA基因表达病原体检测;实时荧光定量PCR技术 实验原理 实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 RNA提取试剂盒 荧光定量PCR Mix TRIZOL dNTP 氯仿 逆转录酶MMLV 异丙醇 Taq酶 DEPC水 ddH2O TE MgCl2 琼脂糖 溴化乙锭 MOPS 甲醛 乙酸钠 EDTA EB 溴酚兰 注意事项 1.荧光阈值:在荧光扩增曲线指数增长长期设定一个荧光强度标准(即PCR扩增产物量标准)。荧光阈值可设定在指数扩增阶段任意位置上,但实际应用要结合扩增效率,线性回归系数等参数来综合考虑。 2.Ct值:在PCR扩增过程中,扩增产物(荧光信号)到达阈值时所经过的扩增循环次数。Ct值具有极好的重复性。 实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的: 1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。 2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。 外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确,重现性最好的定量方法,已得到全世界的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
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长见识全球疫情两年半验核酸基本人人都做过 检验新冠病毒核酸的仪器没见过吧?带你见识它内部构造下集~拆解实验室仪器RTPCR实时荧光定量聚合酶链式反应分析仪IVD;实时荧光定量PCR技术 实验原理 实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 RNA提取试剂盒 荧光定量PCR Mix TRIZOL dNTP 氯仿 逆转录酶MMLV 异丙醇 Taq酶 DEPC水 ddH2O TE MgCl2 琼脂糖 溴化乙锭 MOPS 甲醛 乙酸钠 EDTA EB 溴酚兰 注意事项 1.荧光阈值:在荧光扩增曲线指数增长长期设定一个荧光强度标准(即PCR扩增产物量标准)。荧光阈值可设定在指数扩增阶段任意位置上,但实际应用要结合扩增效率,线性回归系数等参数来综合考虑。 2.Ct值:在PCR扩增过程中,扩增产物(荧光信号)到达阈值时所经过的扩增循环次数。Ct值具有极好的重复性。 实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的: 1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。 2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。 外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确,重现性最好的定量方法,已得到全世界的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
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美国不灭,生物战永不停歇, 2003年的非典(SARS)与17年后出现的新冠肺炎(COVID-19),虽同属冠状病毒引发,却在病毒特性、传播机制、防控难度及社会影响上存在显著差异。结合科学研究与流行病学数据,两者的核心区别可归纳如下: 来自Deepseek 🦠 一、**病毒特性与致病机制** 1. **基因结构与致病性** - **非典(SARS-CoV)**:致死率高达10%,病毒主要攻击肺部,引发急性呼吸窘迫综合征,患者多在早期出现高热(>38℃)、快速进展的呼吸困难。 - **新冠(SARS-CoV-2)**:致死率较低(约2-3%),但病毒结合人体ACE2受体的能力是SARS的10-20倍,使其更易侵入细胞。除肺部外,还可攻击心脏、肾脏等多器官,导致全身性炎症反应。 2. **潜伏期与无症状传播** - 非典潜伏期短(3-5天),发病后才有强传染性; - 新冠潜伏期长(平均7天,最长14天以上),且在潜伏期和无症状阶段即可传播,约40%-50%的感染由无症状者引发。 --⚡ 二、**传播能力与途径** 1. **传染强度差异显著** - 非典的传播周期约为9天,而新冠仅需6-7天即可实现代际传播。 - 新冠感染者咽喉部病毒载量可达非典的**1000倍**,并通过飞沫、接触、气溶胶(密闭空间)甚至粪口途径传播,传播网络更复杂。 2. **超级传播与社会扩散** - 非典的社区传播有限(广州仅55%病例无明确接触史); - 新冠早期即出现家庭聚集(占58%)与隐秘社区传播,防控难度剧增。 🏥 三、**临床管理与防控策略** 1. **症状表现与重症风险** - 非典以青壮年为主(20-40岁),症状急重; - 新冠重症集中于50岁以上及基础病患者,且症状多样(如味觉丧失、轻微乏力),易漏诊。 2. **防控措施的技术演进** - **非典时期**:依赖隔离患者、切断传播链等传统手段; - **新冠时期**:结合大数据追踪、全员核酸检测、快速疫苗研发(如mRNA技术)及分级诊疗体系,科技防控成为核心。 -📊 四、**疫情发展趋势与社会影响** | **对比维度** | **非典 (2003)**
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