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巴傲得生物
7月前
1、变性蛋白 煮蛋白的过程其实就是让蛋白质变性,破坏它的天然结构,变成线性状态。这样在电泳时,蛋白分子才能更均匀地迁移不会因为结构复杂而影响结果 促进 SDS 与蛋白质的充分结合 SDS 作为阴离子去污剂,能够与蛋白质结合,使其完全变性和解聚,形成带负电荷的棒状结构。这种结构在电场中能够稳定迁移,是电泳分离的基础。 3、灭活蛋白酶: 终止酶活性,高温灭活样本中可能降解蛋白的酶,保护目标蛋白完整性 4、均匀上样 煮蛋白后,样品会变得更均一,避免因为蛋白聚集而导致上样不均匀,影响电泳结果的准确性。 #科研 #实验室日常 #SDS-PAGE #变性蛋白 #蛋白
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科研小王子
1年前
其【生物无忧】《蛋白质检测相关生物实验技术指南》精讲完整版 #蛋白质检测 #生物实验技术 #医学 #医学研究
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优宁维不会逃科研人
6月前
WB实验最常用的变性电泳(SDS-PAGE)#WB #WB实验 #wb实验技术
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巴傲得生物
2周前
成功关键点: 温和裂解是关键 1. 避免使用强变性剂(如SDS)。选择NP-40或CHAPS等温和去垢剂的裂解液,以维持蛋白质复合体的完整性。 2.交联策略: 对于微弱或瞬时的相互作用,可考虑使用低浓度的甲醛或DSP等可逆交联剂,在体内“固定”复合物,提高捕获率。 3.盐浓度与pH优化: 适当调整裂解液和清洗液中的NaCl浓度(如150-300 mM)和pH值,可以有效降低非特异性结合,同时保留特异性相互作用。 4.核酸酶处理: 如果目标蛋白是DNA结合蛋白,在裂解液中添加Benzonase或DNase I/RNase A,可降解核酸,避免其介导的假阳性相互作用。 5.新鲜样品: 使用新鲜制备的细胞裂解液进行实验,避免反复冻融,以防止蛋白质降解和相互作用解离。 #内源性Co-IP #Co-IP #温和裂解 #核酸酶 #细胞裂解液
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王先生
6月前
#实验 #科研 #科研狗的日常 #细胞 #知识分享
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科研前沿-kori
1周前
实验室常用试剂缩写及用途 #实验 #实验室日常 #科研#医学生 #研究生日常
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自在心从容~
1周前
每天认识一种食品添加剂#食品安全科普 #食品添加剂#健康饮食
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安娜不喜欢实验
3周前
4分钟掌握Western blot实验原理 #Westernblot实验 #WB实验 #实验步骤 #知识分享 #实验外包
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兰子
4月前
防腐剂“变性乙醇”(酒精),你的护肤品成分表中有吗?
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苇名弦一
2周前
Western Blot/考马斯亮蓝染色 SDS-PAGE电泳配胶#生物学实验#westernblot #sdspage
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SCI 科研助手
1周前
想让Co-IP结果被审稿人认可?关键就这几点! #CoIP #科研 #生物实验 #实验发文
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小猫碎碎念
1月前
这些热门禁用香水千万不能用!#香水#香水分享#朴致闲庭日下#好闻的味道#伪体香
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小芳推荐
1月前
这些禁用香水,千万不能用!#香水#香水测评#香水控#香水分享#朴致远山在牧
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星宝兜兜爸
3月前
#化学 #有机化学
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羧甲基纤维素钠CMC变性淀粉
3周前
羧甲基淀粉CMS在工业中的主要用途#变性淀粉#增稠剂#悬浮剂#保水剂
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淑女爱测评
4周前
这些热门禁用香水,千万不能用! #香水#香水分享 #bom粉漾叠境#香水推荐
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小小张
3周前
这些热门禁用香水,千万不能用❗️#香水#香水分享#先生驾到香水#好闻的味道#热门香水
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喵喵日记本
4周前
这些热门禁用香水,千万不能用❗️。 #香水 #香水分享 #先生驾到臻我之境 #好闻的味道#热门香水
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山东国舜集团
6月前
SDS干法脱硫:省钱高效还环保,绝绝子! #sds干法脱硫 #干法脱硫 #脱硫脱硝 #国舜集团
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淑女爱测评
1月前
这些热门禁用香水,千万不能用!#香水#香水分享 #BOM粉漾叠境 #好闻的味道 #热门香水
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月德纲
5月前
学好数理化,人生处处开了挂 @一团奶疙瘩 #vlog日常 #海外生活 #分享日常生活 #吃货 #美食
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小小张
2周前
这些热门禁用香水,千万不能用❗️#香水#香水分享#先生驾到香水#好闻的味道#热门香水
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可乐爱化妆
5月前
这些粉底液还在用吗? #真实测评#粉底液#粉底液推荐#持妆控油#好物分享
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小猫碎碎念
3周前
这些热门禁用香水,千万不能用❗ #热门香水 #香水避雷 #朴致闲庭日下 #好闻的味道 #双十一
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孤烟
3月前
咳嗽变异性哮喘,记好这几招,再厉害的咳嗽都能缓解#哮喘 #哮喘病 #医学科普 #咳嗽变异性哮喘 #抖出健康知识宝藏
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温柔了岁月
4周前
就这种海底里吃动植物的腐烂残体的胶状物 屁用没有 也就东大呙人炒的跟个宝贝似的 人家老外根本不尿这玩意儿
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小猫碎碎念
1月前
记住这些禁用香水,千万不能用❗️#香水#香水分享#香水避雷#朴致闲庭日下#YSL自由之水
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可持续发展
3月前
SDS-PAGE检验抗体偶联效率 使用变性非还原SDS-PAGE检验抗体偶联寡核苷酸效果。基本实验步骤:1.变性;2.上样;3.电泳;4.考染。
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纤维素变性淀粉制造及应用
8月前
羧甲基淀粉钠CMS应用于石油钻井,降滤失#石油钻井 #羧甲基淀粉钠 #变性淀粉
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易可实验室
1月前
Western Blot核心技术原理与实验流程解析 #wb #易可生物 #易可实验室
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退休老赵(化妆师)
4周前
甲醛超标,过敏掉发?染发是一场豪赌! #美发 #染发 #染发膏 #发色 #女生必看
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青柠说营养
3周前
连续两周每天吃鸡蛋会怎么样? #内容启发搜索
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巴傲得生物
3周前
1.加热,会大大减少样品伪影带的出现,但是需要优化加热的时间,加热时间过长会出现多余的杂带 2.碘乙酰胺(IAM)的添加可能会减少伪影带的。IAM为半胱氨酸的烷基化试剂可以保证蛋白质样品完全变性并保持还原状态 3.8M尿素也可以减少伪影带的出现 #mAb #mAb非还原电泳 #伪影带 #IAM #科研
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飞越0.05
11月前
电泳槽用于蛋白质聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳实验,可适应变性凝胶电泳和天然凝胶电泳。如为变性电泳,蛋白样品加入sds凝胶上样缓冲液煮沸后,以统一的上样量(一般为30-50ug)上样,首个孔中加入蛋白marker,用于指示蛋白分子量。电泳后,蛋白样品中的各种蛋白将按照分子量大小分布于胶的上下不同位置,分子量越小,蛋白位置越靠下。之后将胶转于转印槽中进行转膜,胶中的蛋白质将转到pvdf膜上。转膜后,加入目的蛋白的抗体,进行抗原抗体免疫反应,最终我们将看到目的蛋白的条带,条带越粗,说明样品中该蛋白含量越高。此方法称为western blot,常用来检测样品中特定蛋白含量的多少。#分子生物学 #生物技术
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巴傲得生物
4月前
①蛋白变性 煮蛋白的目的是使蛋白质变性,破坏其天然的三维结构:由多种非共价键,如氢键、疏水离子键,形成的复杂结构),使其线性化。这样可以使蛋白质更容易与SDS(十二烷基硫酸钠)结合,从而在后续的电泳过程中按分子量大小分离。 ②SDS结合 SDS是一种阴离子去污剂,能够与变性的蛋白质结合,形成带负电的复合物。煮蛋白可以确保SDS均匀地结合到蛋白质上,使所有蛋白质的电荷密度一致(电荷与质量比相同),从而在电泳时仅按分子量大小分离。 ③还原二硫键 煮蛋白通常会在含有还原剂(如B-基乙醇或DTT)的缓冲液中进行。这些还原剂可以断裂蛋白质中的二硫键(-S-S-),进一步确保蛋白质完全展开,避免因二硫键导致的蛋白质聚集或异常迁移。 ④防止蛋白降解 高温煮沸可以灭活样品中可能存在的蛋白酶,防止蛋白质在后续步骤中被降解。 ⑤提高上样均一性 煮蛋白后,蛋白质会均匀分散在样品缓冲液中,避免因蛋白质聚集或沉淀导致的上样不均一性。 #蛋白质变性 #WB #SDS #二硫键 #科研
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一只发财鱼
2月前
这些热门育发液看仔细了再入!#育发液 #防脱生发 #育发液测评 #长头发的烦恼 #掉发的烦恼
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【干洗店同款】2瓶装 羽绒服蓬松去污洁净洗涤剂香氛家用去污防结块#羽绒服洗涤剂 #去污蓬松 #家用洗涤剂 #香氛洗涤剂 #干洗店同款
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特丰助剂官方账号
3天前
直观感受:什么是触变性?触变剂是如何防沉降抗流挂的? 静置增稠剪切变稀,触变性赋予涂料油墨胶粘剂等良好施工性,同时具有防沉降抗流挂的作用。#触变剂 #涨知识 #触变剂厂家 #化学实验 #聚脲
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带带在华科
4周前
电泳后大分子离奇失踪是怎么回事?#带带的研究生日常 #WB#电泳
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搬鲜Mfresh宠丰汇宠物食品专卖店
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不怕你验货,就怕你不来验。 首批体验,给你‘开袋也退’的底气!只为证明:世上还是有诚实的狗饭!”#狗饭#鲜粮说
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优品生物
2周前
大分子vs小分子蛋白,怎么跑WB才不失败? #WB #科研狗的日常 #实验室日常 #研究生 #导师
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优品生物
4周前
还有救吗?!WB没加Loading Buffer就煮沸了 #WB #科研狗的日常 #实验室日常 #研究生 #导师
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goodhealth好健康骨胶原海外店
1周前
真假洋牌,要警惕! #goodhealth好健康骨胶原 #骨胶原 #膝盖 #半月板 #假洋牌 -1212唐袁
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4周前
粉末涂料的触变性#粉末涂料与涂装实用技术 #粉末涂料助剂厂家
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小华
1月前
#视力保护 #用药攻略 #眼科健康
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RP温暖之家(公众号同名)-小家
4周前
9顺式β胡萝卜素对RP的作用如此神奇? #RP患者 #9顺式β胡萝卜素 #视网膜色素变性 #眼睛疾病
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4月前
脱 氧 剂 #科普 #食品知识科普 #食品安全 #脱氧剂
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博雅传奇
9月前
阴离子表面活性剂K12#实验室日常 #化工 #技术分享 #清洗 #@酒石酸钾钠
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日用品酒精湿巾MSDS报告#SDS#检检测报告#出口报告#安全技术说明书
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选矿刘工
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