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EMSA:优点多但也有小遗憾! 宝子们!今天来唠唠 EMSA(凝胶迁移实验)的优缺点,帮大家更全面认识这个研究蛋白 - 核酸互作的 “神器”~ 优点很亮眼 灵敏度超高:用放射性同位素标记核酸后,哪怕蛋白和核酸浓度很低,EMSA 也能精准检测到它们的结合,像 “显微镜” 一样,低浓度下也不放过信号~ 适用范围广到没朋友:不管是不同大小、结构的核酸,还是从小肽到大型转录复合物的各种蛋白质,EMSA 都能轻松 hold 住,兼容性直接拉满~ 操作还特简单:基本技术稳定又好上手,能适应各种结合条件,新手也能轻松驾驭,属于 “门槛低、实用性强” 的类型~ 缺点也得认清 没法精准定位结合位点:EMSA 能看出蛋白和核酸区域的整体结合,但要问 “哪个氨基酸位点和核酸片段互动”,它就给不出答案啦,结果有一定局限性~ 细胞提取物研究有短板:如果用没纯化或部分纯化的细胞提取物,里面一堆核酸结合蛋白会干扰结果,得搭配其他技术,才能确定 “到底是哪个蛋白导致迁移率变化”~ 迁移率受多种因素影响:电泳时,不光复合物大小会影响迁移速度,蛋白电荷、核酸特性这些也会掺和进来,分析结果时得考虑得更全面~ EMSA 有优势也有局限,实验时得根据需求来选择~ 想知道怎么扬长避短做实验? 戳视频,把 EMSA 的优缺点和应用思路讲透~ #生物 #实验 #科普 #EMSA #知识前沿派对
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